Microfunnel一次性过滤漏斗100ml ST单元，0

Northern blotting实验方案

Stringency Wash Solution#1 (100 cm2膜面积加入20 ml洗膜溶液)，室温下，摇动洗膜5min两次。 5.12.2 高严紧性洗膜： 加入High Stringency Wash Solution#2 (100 cm2膜面积加入20 ml洗膜溶液)，42℃ 摇动洗膜20 min两次。 5.13 曝光： 5.13.1 将膜从洗膜液中取出，用保鲜膜包住，以防止膜干燥。 5.13.2 检查膜上放射性强度，估计曝光时间 5.13

金开瑞生物超滤离心管（15 mL）全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换，一根搞定

损。 04 避坑要点 ▪沉淀必先去除：蛋白聚集体会不可逆堵膜，流速归零即报废；   ▪起始浓度≥ 1 mg/mL：过低会因膜吸附导致回收率骤降；浓缩倍数建议≤ 20×； ▪膜不可晾干：干燥后孔径改变、基本报废，暂不用须保湿 4 ℃ 存放； ▪非无菌产品：严禁高温高压灭菌、次氯-酸-钠消毒；表面消毒仅限 70% 乙醇短时处理； ▪高盐（> 500 mM）先稀释：缓冲液 pH 差 ≤ 1，防止蛋白沉淀； ▪一次性使用：科研发表、GMP/GLP 场景禁止复用，珍贵样本

侧群干细胞（sp细胞）的分离与分选

准备工作： DF12 加入0.1%BSA，100ml,取10ml冰浴，40ml放入孵箱；其余的放入4度； DNase I 100*; PI：50ug/ml; Hoechst33342: 1000ug/ml（all from Sigma） 计数板，冰盒；各种离心管，无菌流式管（BD），400滤网（BD） 染色方案： ① 细胞染色： 细胞消化计数，用DF12重悬，调整到1×106/ml浓度，分成三组2管； 37℃DF12洗涤，制备成单