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上海研谨生物科技有限公司
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大量存货
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1/包
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文献和实验/L pH8.9Tris-HCl 缓冲液)、浓缩胶缓冲液(0.5mol/L pH6.7Tris-HCl 缓冲液)、10%过硫酸铵、10%TEMED、pH8.3Tris-Gly电极缓冲液、1%琼脂糖溶液、0.05%考马斯亮兰R250、7%醋酸 器材:垂直板电泳槽、稳压稳流电泳仪、脱色摇床四、操作方法 1、安装夹心式垂直板电泳槽 (1)装上贮槽和固定螺丝销钉,仰放在桌面上。 (2)将长、短玻璃板分别插到凵形硅橡框的凹形槽中,注意勿用手接触灌胶面的玻璃。 (3)将已插好玻璃板的凝胶
槽,10 min左右,上胶即可聚合,再放置10-20 min,加入电极缓冲液,使液面没过短玻璃板约0.5 cm,轻轻取出样品槽模板,即可加样。 4.样品的处理及加样 将样品按0.5–1 mg/ml加样品溶解液,溶解后,将其转移到带塞的小离心管中,轻轻盖上盖子(不要塞紧,以免加热时迸出),在100℃沸水浴中加热3min,取出冷却后加样。 用微量进样器取25 l上述混合液,通过缓冲液,小心地将样品加到凝胶凹形样品槽底部。 5 .电泳 将电泳仪的正极与下槽连接,负极与上槽连接,接通冷却水,打开
一橡胶圈或垫适量玻璃棉,以防止固体落人容器下部,造成事故。 (2)使用前要检查气密性。 (3)加入试剂时,先加块状固体。选择大小合适的块状固体试剂从容器上部排气孔放入,均匀置于球形漏斗颈的周围,塞上带导气管的单孔塞后,打开活塞,再从球形漏斗口加入液作试剂,直至进入容器后又刚好浸没固体试剂,此时关闭导气管上的活塞待用。 (4)启普发生器禁止加热使用。 (5)若需更换液体试剂时,可将启普发生器放置在实验桌边,使容器下部塞子朝外伸出桌边缘,下面用一容积大于球形漏斗的容器接好,再小心打开塞子
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