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Lymphocyte Separation Medium 1.077
475
北京百奥莱博科技有限公司
100ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括淋巴细胞分离液1.077北京厂家现货在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:淋巴细胞分离液1.077北京厂家现货
品牌:百奥莱博
规格:100ml
编号:SY0532
英文名:Lymphocyte Separation Medium 1.077
产地:国产|进口
淋巴细胞分离液(Lymphocyte Separation Medium,简称LSM)是一种无菌的即用型分离液,基于Böyum的Ficoll-甲泛影钠溶液做过一些改良,使得操作简单快速且分离效率更高。每100 ml淋巴细胞分离液中含有6.2 g 聚蔗糖(Ficoll)和9.4 g 泛影酸钠,20℃下的密度为1.0770-1.0800 g/ml。不仅适用于外周血淋巴细胞,也可分离其他组织来源的淋巴细胞,包括脐带血和骨髓细胞。
工作原理
去纤维蛋白或肝素化人血以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,加在分离液上层,之后低速离心30 min。在离心过程中,差速迁移使其最终形成几个细胞分层。聚集在管底的颗粒主要是红细胞和多形核粒细胞,通过梯度迁移至管底。根据其密度的大小,淋巴细胞和其他单个核细胞如单核细胞,以及血小板分布在血浆和LSM两层之间。淋巴细胞可以通过吸取分界层溶液回收,并通过进一步清洗来去除血小板,LSM和血浆。
操作方法
注:此操作流程适用于去纤维蛋白或抗凝血剂处理过的人血。对于其他物种或者其他组织的血液,可能需要对此步骤做出一定的改进。
1)轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合;
2)无菌条件转移3 ml LSM到15 ml离心管中;
3)用2 ml 生理盐水混合2 ml去纤维蛋白血液或肝素化血液;
4)小心将稀释血液加入3 ml LSM(室温即可)的上层,使得在血液和LSM间形成一个明显的分层。不要将稀释血液混入LSM中;
5)室温下400g离心15-30min,离心可以沉淀红细胞和多形核白细胞,同时可以在LSM上形成一层单核-淋巴细胞分层,如下图所示(从上到下,依次分为血浆层-淋巴细胞层-LSM层-RBC颗粒);
6)吸出淋巴细胞层上方2-3 mm内的血浆;
7)吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM层,并转移到另外一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至离心管内的淋巴细胞层中,室温离心10 min,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞的范围,例如160 – 260 g(清洗去除LSM和降低血小板含量);
8)用平衡盐缓冲液再清洗细胞一次,最后取适当的培养基重悬细胞。
注意事项
1)稀释去纤维蛋白血液或肝素化血液用的生理盐水为无菌液体。
2)为保持淋巴细胞的活性,应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层,包括淋巴细胞和单核细胞。
3)若溶液变浑浊,呈现出不同的黄色或可能有受污染迹象,不可再使用。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
欲了解更多淋巴细胞分离液1.077北京厂家现货的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·碱性磷酸酶活性检测试剂盒
编号:SY0467
英文名称:Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit
规格:100T
本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒,可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照,可进行达100个样品的检测。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,简写为ALP或AKP),又称碱性磷酸酯酶,是一组同工酶,目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织,是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解,从而将底物分子上的磷酸基团去除,转化为羟基。此类底物包括核酸(DNA、RNA)、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等;生物学中碱性磷酸酶(ALP)水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标,如:1)作为iPS成功诱导的标志;ALP在大多数细胞类型中均有表达,但是在iPS细胞内的表达水平明显升高;2)结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标;3)血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症,常被认为和恶性胆管阻塞,原发性硬化胆管炎,肝癌,肝硬化等肝胆疾病密切相关;4)血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成,以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关;5)碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况,多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说,血清内ALP的范围为40-150U/L。
对硝基苯磷酸(p-nitrophenyl phosphate, pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,碱性条件下,可在ALP作用下生成对硝基苯酚(p-nitrophenol, pNP),后者在碱性环境下呈黄色产物,并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深,说明ALP活性越高,反之则活性越低。因此,通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。
产品规格:
ALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer | 15ml | -20℃ |
显色底物 pNPP Substrate | 2管 | -20℃避光 |
pNP标准品溶液p-nitrophenol Standard | 100ul (10mM) | -20℃避光 |
反应终止液 Stop Solution | 12ml | -20℃ |
空白对照(Blank) | 标准品(Standard) | 样品(Sample) | |
ALP反应缓冲液 | 50μl | (100-x)μl | (50-y) μl |
显色底物 | 50μl | - | 50μl |
样品 | - | - | yμl |
标准品工作液 | - | xμl | - |
北京百莱博科技有限公司专业生产细胞分离液产品,欢迎来电咨询选购淋巴细胞分离液1.077北京厂家现货。
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