- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL-D3620
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
5×SDS-PAGE loading buffer
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
2ml
6×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
规格：2ml英文名：5×SDS-PAGE loading buffer
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer，适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液是一种以溴酚蓝为染料， 6×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液，用于常规的SDS-PAGE 蛋白电泳样品上样。
操作步骤
1. 按每5 微升蛋白样品加入1 微升6×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(6X)。
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟，以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟，10000rpm 离心1 分钟，取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
储存：4℃，有效期12个月。
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文献和实验一般先配制50倍的TAE缓冲液，用时再稀释成1倍的。 50倍TAE缓冲液的配制方法为 1. 称取下列试剂于1L烧杯中： Tris 242g Na2 EDTA.2H2 O 37.2g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水，充分搅拌溶解
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
2～4 h，使抗体与 protein A 琼脂糖珠偶连； 免疫沉淀反应后，在 4 ℃ 以 3 000 rpm 速度离心 3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3～4 次；最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液，沸水煮 5 分钟； SDS-PAGE，Western blotting 或质谱仪分析。 四、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜
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