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- BD-GS009
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2—25℃
- 保质期：
一年
- 库存：
50
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
20支
英文名称：
产品规格：20支
ONPG产品用途： 用于沙门氏菌和志贺氏菌生化鉴定
1、 液体培养基:把培养基配好，液体一般5mL就装试管，50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中，高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于，三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌，瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了，自己现做什么的也怪麻烦的。
ONPG固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂，一般是100mL装瓶，或者是200mL装瓶（装500mL的三角瓶），灭完菌后，在培养基温度降到一定程度，培养基还呈溶液状态的时候，就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉，不然琼脂就凝固成块块了。当然，灭好菌后，也可以等到要用的时候再倒平板，倒之前微波炉加热，溶解琼脂，冷却到一定温度再倒就行。（建议如果以前从来没弄过固体培养基，也找个人替你操作几次）这部分的内容，可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存，所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉，扔冰箱就行。都准备就绪以后，直接用500-1000uL的培养基溶解干粉，浓度高，接活率高。然后有几种方法可以选择：
1）.直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基（已经加了抗性）中，37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间，一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2）.为了防止接菌量太少，导致菌体不生长，可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中，37C摇瓶培养，这个按说应该会长得比较快一点，因为通气量大。所以你可以都接上，看情况。
3）.还有为了防止污染，会直接取菌液在固体培养基上划线，这样长出来的是单菌落，根据菌落大小和形态，就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高，因为接菌量小，如果菌体活力稍弱，就容易完全不长。
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文献和实验成分 邻硝基酚β-D-半乳糖昔（ONPG） 60mg （O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside） 0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.5） 10mL 1%蛋白胨水（PH7.5） 30mL 制法 将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm试管，每管0.5mL,用橡皮塞塞紧。 试验方法 自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于36±1℃培养1~3h和24h观察
缓冲液： Na2H2PO4 6．9克 溶于40DW中，用5NNOH调PH7．0，再加水到50毫升，冰箱保存．用前若有结晶可稍加温，溶解后再用． ONPG液： 称取ONPG（邻硝基酚--B--D半乳糖苷）80毫克，溶于15毫升D.W中，再加上缓冲液5毫升，放入冰箱中保存．此液不稳定，如出现黄色即不能用． 鉴别： 脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属． 脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性． 乳球菌，枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性．
培养基、糖发酵管、ONPG培养基、半固体琼脂、丙二酸钠培养基、沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。4 检验程序沙门氏菌检验程序如下：5 操作步骤5.1 前增菌取检样25g，加入225mL缓冲蛋白胨水于均质杯内。用均质器以8000~10000r/min打碎1min，于36±1℃培养4h（干蛋品培养18~24h），移取10mL，转种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液（MM）或四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液内，于42℃培养18~24h。同时，另取10mL，转种
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