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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2—25℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
SLB Broth
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
250g
英文名称:SLB Broth
产品规格:250g
产品用途: 主要用于过滤膜的检测
用途:用于ATCC19146缺陷型假单胞菌等的增菌培养。
成分(g/L)
氯化钠 7.6
乳糖 0.39
缺陷假单胞菌培养液(SLB肉汤)pH值 6.9±0.1 25℃
1、 液体培养基:把培养基配好,液体一般5mL就装试管,50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中,高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于,三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌,瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了,自己现做什么的也怪麻烦的。
缺陷假单胞菌培养液(SLB肉汤)固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂,一般是100mL装瓶,或者是200mL装瓶(装500mL的三角瓶),灭完菌后,在培养基温度降到一定程度,培养基还呈溶液状态的时候,就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉,不然琼脂就凝固成块块了。当然,灭好菌后,也可以等到要用的时候再倒平板,倒之前微波炉加热,溶解琼脂,冷却到一定温度再倒就行。(建议如果以前从来没弄过固体培养基,也找个人替你操作几次)这部分的内容,可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存,所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉,扔冰箱就行。都准备就绪以后,直接用500-1000uL的培养基溶解干粉,浓度高,接活率高。然后有几种方法可以选择:
1).直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基(已经加了抗性)中,37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间,一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2).为了防止接菌量太少,导致菌体不生长,可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中,37C摇瓶培养,这个按说应该会长得比较快一点,因为通气量大。所以你可以都接上,看情况。
3).还有为了防止污染,会直接取菌液在固体培养基上划线,这样长出来的是单菌落,根据菌落大小和形态,就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高,因为接菌量小,如果菌体活力稍弱,就容易完全不长。
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文献和实验基的那一组,用接种针挑取完全培养基上长出的菌落80个,分别点种于基本培养基与完全培养基平板上,先点种基本培养基,后点种完全培养基,置于37℃恒温箱中培养。 (2)培养12h后,选在基本培养基上不生长,而在完全培养基上生长的菌落,再在基本培养基的平板上划线,置于37℃恒温箱培养。24h后不生长的可能是营养缺陷型。 四、生长谱鉴定 1.突变菌株的培养与收集 (1)将可能是缺陷型的菌落接种于盛有5ml肉汤培养液的离心管中,37℃培养14-16h。 (2)培养后,3500rpm
中加入了抗菌素,也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见。 § 培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊, pH 改变。污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡。 2 、真菌污染 § 真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种,最常见的真菌有烟曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。 § 培养细胞受真菌污染后,可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点,有的散在
污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。一、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素(一般为预防剂量),也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见。培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变,只能在镜下发现菌体才知污染。所以,每天应仔细
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