SY0441型人源高氧化程度低密度脂蛋白价格厂家

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北京百奥莱博供应的SY0441型人源高氧化程度低密度脂蛋白价格厂家用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多人源高氧化程度低密度脂蛋白等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：SY0441型人源高氧化程度低密度脂蛋白价格厂家
编号：SY0441
英文名：Human High Oxidized Low Density Lipoprotein (Human High Ox-LDL)
品牌：百奥莱博
规格：2mg
我司提供的人源高氧化低密度脂蛋白（Human High Oxidized Low Density Lipoprotein，High Ox-LDL），是由过度铜离子介导人血浆来源的LDL进行的氧化修饰。新鲜血浆经检测为HCV，HBsAg和HIV阴性。本产品为无菌包装，可以直接稀释使用。本High Ox-LDL具有的高氧化水平使其产生明显的氧化应激，能够用来诱导细胞凋亡，以及建立细胞损伤模型。我们还提供中等氧化程度的Ox-LDL（SY0439），广泛用于脂质代谢的研究。除提供Ox-LDL，我们还提供人源乙酰化LDL（Ac-LDL），以及荧光标记的LDL。

LDL是由极低密度脂蛋白（VLDL）转变而来，主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，运输到肝脏合成胆酸，其可用于研究受体介导的内吞作用过程，尤其是在动脉粥样硬化等疾病中，其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。

氧化的LDL（Ox-LDL）是修饰LDL中的一类。修饰的LDL除包括氧化修饰的LDL外，还包括乙酰化LDL及丙二醛（MDA）、4-羟烯酸（4-HNE）直接结合的LDL，这些未经氧化修饰而仅经一般化学修饰的LDL称为衍化的LDL。不同于衍化的LDL，Ox-LDL 的生理学独特性表现在：1）在细胞生理功能影响上，Ox-LDL可诱发细胞毒性作用，影响花生四烯酸的代谢，抑制胆固醇酯化作用等，但衍化的LDL无上述效应；2）Ox-LDL消耗LDL内源性抗氧化物质，使LDL上的维生素E含量下降，而MDA-LDL无上述效应；3）氧化修饰涉及脂质过氧化反应，LDL中的PUFAs被氧化。MDA对LDL修饰，是直接和ApoB-100结合成希夫氏碱，脂质过氧化反应轻微；4）氧化LDL在氧化程度低时，ApoB降解；在氧化程度高时，ApoB又可发生再聚合。MDA对LDL的修饰，ApoB无降解、聚合反应发生；5）Ox-LDL 产生的荧光峰波长为430nm，而MDA -LDL的荧光峰波长为460nm。Ox-LDL不经LDL受体代谢，由清道夫受体识别、结合、内吞饮入细胞并丧失正常的胆固醇代谢途径，引起细胞内脂质沉积，泡沫样变。

LDL氧化修饰的方式有很多种，常见的有：1）细胞介导的LDL氧化修饰，又称为生物氧化修饰的LDL。如内皮细胞，巨噬细胞，单核细胞都具有此功能；2）过度金属离子介导的LDL氧化修饰，如Ca2+，Fe2+等；还有其他形式的氧化修饰，包括物理方法如紫外线，或过氧化物酶催化。

蛋白纯度：＞97%（琼脂糖凝胶电泳）
蛋白浓度：0.8-3.0 mg/ml
外观：无色乳状液体
缓冲液组分（Buffer Components）：PBS, pH 7.4
氧化程度（Oxidized Level）：TBARS检测（根据MDA的含量反映LDL的氧化程度）
起始LDL：0.1~0.5 nmol MDA/mg蛋白
高Ox-LDL：90~100 nmol MDA/mg蛋白
储存条件：4℃，避光，有效期4周

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·细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI)
编号：SY0471
英文名称：Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
规格：20 rxn
Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒是用FITC标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用荧光显微镜、流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

注意事项

1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。


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BTN130433 磁珠动物DNAOUT MAG Animal DNAOUT
2-脱氧-D-葡萄糖 Boc-L-aspartic acid 4-benzyl ester 154-17-6
6578-06-9 5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸盐 BCIP
BL0964 正常人血清
ARB10576 人成骨生长肽(OGP)含量检测 Human osteogenic growth Peptide,ogp ELISA KIT
ARB10016 人25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)Elisa定量检测 Human 25-dihydroxy vitamin d3,hvd3 ELISA KIT
HC0130 大张滤纸
1,3,5-三溴苯 Maltose Phosphorylase 626-39-1
BTN131118 乙烯乙二醇 Ethylene Glycol
ARB10680 人血管舒缓激肽(BK)ELISA检测服务 Human bradykinin,bk ELISA KIT
ARB10226 人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)检测服务 Human amyloid beta Peptide 1-40,aβ1-40 ELISA KIT
ARB13600 兔子补体片断3A(C3A)免费代测 Rabbit complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
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·焦炭酸二乙酯
编号：SY0265
英文名称：DEPC
规格：25ml
DEPC是一种高效烷化剂，通过和RNase的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。可以用作抗菌添加剂、组氨酸残基改性剂，以及用于亚胺转变为氨基甲酸酯的试剂。在溶液中浓度约为 0.1% (v/v) 时可使 RNase 失活，从而防止 RNA 被降解。

·通用型全血PCR试剂盒
编号：SY0050
英文名称：Animal Blood Direct PCR Kit
规格：50T
全血直接PCR试剂盒（Blood direct PCR Kit）可以直接对全血样本进行PCR，无需进行DNA纯化或样品预处理，大大降低了污染风险，缩短时间和节约支出。

试剂盒中包含配方优化的2×Blood Buffer，而血液DNA聚合酶专为全血DNA直接扩增而设计，对全血样品中的PCR抑制剂具有超强的抵抗力，可扩增全血浓度高达40%。高度优化的反应体系使得Blood direct PCR Kit能够从全血样品中高效扩增长达10 kb的基因组片段。扩增产物为平端，适用于速克隆试剂盒。另外，试剂盒中配有与哺乳动物和其他许多脊椎动物兼容的引物预混液Positive control primer mix，可用于进行阳性对照反应。

该试剂盒可用于直接扩增的血样类型包括：新鲜血液、4℃贮存血液、冷冻血液以及储存在Whatman 903和FTA商用卡上的干血渍，且兼容所有常规抗凝剂 (EDTA、柠檬酸盐、肝素等)。Blood Direct PCR Kit已经在许多哺乳动物物种上进行了成功测试，并成功扩增了几种禽类全血。

产品组份：

组分	50T	200T
Blood Super-Fidelity DNA Polymerase（1U/μl）	75 µl	300 µl
2×Blood Buffer	1.25 ml	1.25 ml×4
Positive control primer mix (10 μM each)	50 µl	50 µl
10 mM each dNTPs	50 µl	200 µl
10×Loading buffer	1.25 ml	1.25 ml

储存条件：-20℃。

质量控制：50 μl PCR体系中，以5 μl人全血为模板扩增7.5 kb片段。35个循环后将1/10 PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的7.5 kb条带。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）推荐血液模板使用量为反应总体积的1/10，即50 μl的反应体系内加入5 μl全血。
3）吸取抗凝血，尤其是长期存放过的抗凝血时，应尽量避免吸取血液凝块。
4）延伸时间按30 sec/kb设定，如不足15 sec，设置15 sec即可。超过5 kb片段扩展时，如发现扩增效率较低，可适当延长延伸时间至60 sec/kb。
5）PCR完成后，推荐将反应液于1,000×g (大约4,000 rpm) 离心1～3 min以沉淀血细胞碎片，之后取上清进行下游分析。

操作方法

1. 反应体系配制：
所有组分解冻后请充分摇匀，使用完毕后及时放回-20℃。

ddH2O	Up to 50 μl
引物1 (10 μM) a	2 μl
引物2 (10 μM) a	2 μl
10 mM each dNTPs	1 μl
2×Blood Buffer c	25 μl
全血b	5 μl
Blood Super-Fidelity DNA Polymerase（1U/μl）d	1.5 μl

a. 推荐每条引物使用终浓度为0.4 μM，引物使用量太多会导致非特异性扩增增加。
b. 最适全血模板浓度范围为1%～20%，推荐使用10%作为初始尝试条件，尽量避免吸取血液凝块。如果样本是贮存在Whatman滤纸卡上的干血渍，则可取约1mm2带血渍的圆纸片，将其直接放入PCR反应液中，无需预处理。
注1：对于禽类和血细胞中带细胞核的其他物种，可能需要减少用于PCR反应的血量。
注2：全血若短期贮存 (少于3个月)，可置于4℃；若长期贮存，推荐存于-20℃或者Whatman FTA/903卡上。
c. 对于使用全血模板的大多数PCR反应，Mg2+最佳终浓度为2 mM。2×Blood Buffer已含有终浓度为2.0 mM 的Mg2+。但Mg2+的最佳浓度会随引物、反应中的血液浓度和所用贮存卡的种类的不同而改变。如推荐反应体系无法正常扩增时，可用25 mM MgSO4，以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。
d. Blood Super-Fidelity DNA Polymerase是一种带有校对活性的高保真聚合酶，其保真度是普通Taq聚合酶的52倍。该酶中添加了可以在常温下封闭其外切酶和聚合酶活性的单克隆抗体，可进行高特异性的热启动PCR。
注1：Blood Super-Fidelity DNA Polymerase具有较强的校对活性，扩增产物为平末端。如扩增产物需要进行TA克隆，加A之前必须进行DNA纯化。
注2：提高酶的使用量有助于扩增产量的提高，但请勿超过2 U/50 μl。
2. PCR反应条件设置

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性a	95℃	5 min	1
变性	95℃	15 sec	35d
退火b	56℃～72℃	15 sec
延伸c	72℃	30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5 min	1

a. 预变性(95℃，5min)可以让白细胞裂解，释放可用于PCR扩增的基因组DNA。 请勿缩短时间或降低温度。
b. Blood Super-Fidelity DNA Polymerase能够促进模板和引物高效退火。一般来说，退火温度设置为引物Tm值即可。然而，使用高的退火温度可以有效减少非特异性扩增，并提高全血模版的扩增效率。因此，如扩增产物特异性较差，可以建立一个温度梯度反应去寻找引物模板最适退火温度。推荐退火时间设置为15 sec即可。
c. 延伸时间按30 sec/kb设定，如不足15 sec，设置15 sec即可。超过5 kb片段扩展时，如发现扩增效率较低，可适当延长延伸时间至60 sec/kb。
d. 一般而言，35个循环已可以扩增足量产物。太多的循环将会导致非特异性扩增增加，且有可能会降低扩增保真度。
注：如退火温度高于68℃，可将退火过程和延伸过程合并，进行两步法PCR。温度设定为退火温度(如高于72℃，则设置为72℃即可)，时间设置为30 sec/kb。
3. 扩增产物分析

PCR完成后，建议将反应液于1000×g (大约4000rpm) 离心1～3 min以沉淀血细胞碎片，之后取上清进行下游分析。该步骤可有效去除多种血液组分。当使用高浓度血液模板时此步尤为重要，因为经过PCR循环，反应管中会存在大量的血细胞碎片。这些碎片会干扰下游的检测，如琼脂糖电泳检测。若需对PCR产物进行酶切分析(PCR-RFLP)，应预先将其稀释2～4倍，以去除存在于PCR反应液中的盐及其它抑制剂对酶切反应的干扰。

4. 对照反应

试剂盒中提供引物预混液Positive control primer mix(10 μM each)用于阳性对照反应。可从哺乳动物及其他许多脊椎动物的基因组中扩增237 bp的片段。该扩增区位于sox21基因的上游，是一段高度保守的非编码区。
Primer #1 (24-mer) 5’- AGCCCTTGGGGASTTGAATTGCTG -3’
Tm: 69.5℃(S=G or C)，使用Primer Premier 5 计算。
Primer #2 (27-mer) 5’- GCACTCCAGAGGACAGCRGTGTCAATA -3’
Tm: 67.9℃ (R=A)，71.5℃ (R=G)，使用Primer Premier 5 计算。
4.1 反应体系

ddH2O	Up to 50 μl
Positive control primer mix (10 μM each)	2 μl
10 mM each dNTPs	1 μl
2×Blood Buffer	25 μl
全血	5 μl
Blood Super-Fidelity DNA Polymerase（1U/μl）	1.5 μl

4.2 PCR反应条件设置

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min	1
变性	95℃	15 sec	35
退火	68℃	15 sec
延伸	72℃	15 sec
彻底延伸	72℃	5 min	1

全血扩增引物设计注意事项

1）引物3’端最后一个碱基选择C或G；
2）引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配；
3）引物3’端尽量避免出现发夹结构；
4）引物Tm值控制在60℃-72℃之间 (推荐使用软件Primer Premier 5进行计算)；
5）引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
6）引物GC含量控制在40%-60%之间；
7）正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。

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