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- 2025年07月11日
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- 技术资料
- 保存条件：
2—25℃
- 保质期：
一年
- 库存：
50
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
1ml/支*5
英文名称：
产品规格：1ml/支*5
多粘菌素B(4ug)产品用途： 取一支添加于200ml亚硫酸铁多粘菌素B琼脂中
1、 液体培养基:把培养基配好，液体一般5mL就装试管，50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中，高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于，三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌，瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了，自己现做什么的也怪麻烦的。
多粘菌素B(4ug)固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂，一般是100mL装瓶，或者是200mL装瓶（装500mL的三角瓶），灭完菌后，在培养基温度降到一定程度，培养基还呈溶液状态的时候，就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉，不然琼脂就凝固成块块了。当然，灭好菌后，也可以等到要用的时候再倒平板，倒之前微波炉加热，溶解琼脂，冷却到一定温度再倒就行。（建议如果以前从来没弄过固体培养基，也找个人替你操作几次）这部分的内容，可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存，所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉，扔冰箱就行。都准备就绪以后，直接用500-1000uL的培养基溶解干粉，浓度高，接活率高。然后有几种方法可以选择：
1）.直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基（已经加了抗性）中，37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间，一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2）.为了防止接菌量太少，导致菌体不生长，可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中，37C摇瓶培养，这个按说应该会长得比较快一点，因为通气量大。所以你可以都接上，看情况。
3）.还有为了防止污染，会直接取菌液在固体培养基上划线，这样长出来的是单菌落，根据菌落大小和形态，就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高，因为接菌量小，如果菌体活力稍弱，就容易完全不长。
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文献和实验【讨论】碱裂解法大规模质粒提取，自己配的溶液提出2000ug/ml的质粒啊
沉淀。 9.用70%乙醇室温漂洗一次，12000g离心5min，小心弃上清，倒置离心管在滤纸上，流净乙醇，或用消毒滤纸条小心擦净管壁上乙醇，室温放置5min使乙醇蒸发。 10.加入1ml的TE，PH8.0。溶解DNA沉淀。 我没有用酚氯仿抽提，因为等体积的话就要200-300ml呢，我想着提出来再抽提也行。 用的eppendorf测质粒浓度的那个机器，分光光度的那种吧 浓度有2000ug/ml ， 260/280 2.00左右 260/230
基础琼脂 3．4克 无菌抗凝羊血 10毫升 20%葡萄糖溶液 1毫升 万古霉素 0．2毫升 多粘菌素B 0．0375毫升 水 90毫升 用法： 1取基础琼脂浸泡于水中，加热煮沸溶解，121℃高压灭菌20分钟． 2加入羊血和葡萄糖，于90℃水浴中加热，不时摇动使成咖啡色． 3冷却至60℃，加入万古霉素和多粘菌素B溶液，摇匀倒入平板，凝固备用．
成分 蛋白胨 10g 牛肉膏 1g 甘露醇 10g 氯化钠 10g 琼脂 15g 蒸馏水 1000mL 0.2%酚红溶液 13mL 50%卵黄液 50mL 多粘菌素B 100 国际单位/mL pH7.4 制法
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