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Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
512
北京百奥莱博科技有限公司
20次|50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括YT131型Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒说明书在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:YT131型Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒说明书
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:YT131
规格:20次|50次
英文名:Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
本试剂盒是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。一个包装的本试剂盒共可以检测20个细胞样品。
试剂盒组份:
Annexin V-FITC——————100µl
Annexin V-FITC结合液———12ml
碘化丙啶染色液——————220µl
Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷脂结合蛋白,参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。
Annexin V选择性结合磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称PS)。磷脂酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。磷脂酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合后可以阻断磷脂酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。
用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。
本试剂盒还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液,碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。对于坏死细胞,由于细胞膜的完整性已经丧失,Annexin V-FITC可以进入到细胞浆内,与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸结合,从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。
本试剂盒的流式检测效果参考图1和图2,荧光显微镜检测效果参考图3。
图1.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测细胞凋亡的效果图。Jurkat细胞未经处理(A)或用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时(B)后,用本试剂盒染色,然后用流式细胞仪进行细胞的散射和荧光检测。从图中可以看出,经过凋亡诱导剂喜树碱处理后的细胞,其Annexin V-FITC染色阳性并且PI染色阴性的细胞,即凋亡细胞,明显增加(B图的右下象限),Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞,即坏死细胞,也有所增加(B图的右上象限)。图中Annexin V-FITC染色阴性PI染色阳性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B图的左上象限)出现的细胞点是许可范围内的检测误差。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
图2.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测效果验证图。Jurkat细胞用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时后,未经染色(A)、仅用本试剂盒中的PI进行染色(B)、仅用本试剂盒中的Annexin V-FITC进行染色(C)、用本试剂盒中的Annexin V-FITC和PI进行双染(D)。从图中可以看出,未经染色的是双阴性细胞(A),仅PI染色后出现了预期的PI染色阳性的细胞,仅Annexin V-FITC染色出现了预期的Annexin V-FITC染色阳性的细胞,Annexin V-FITC和PI双染出现了预期的仅Annexin V-FITC染色阳性的凋亡细胞和双阳性的坏死细胞。出现的非预期的细胞点完全在许可的误差范围内。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
注意事项:
1. 如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
2. 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
3. 如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
4. 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
5. 用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
储存条件:4℃避光,有效期6个月。
想要了解更多关于YT131型Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒说明书的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
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YT131型Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒说明书关键词:Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒,YT131,Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
·细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)
编号:YT121
英文名称:DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
规格:50次
本试剂盒是目前最先进的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder,同时又可以抽提到最大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。
DNA ladder也称DNA fragmentation,是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder,就可以判定细胞发生了凋亡。
样品首先被蛋白酶K消化,随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液,然后加入到纯化柱内。通过高速离心,使DNA在穿过纯化柱的瞬间,结合到纯化柱上,随后通过两次洗涤去除各种杂质,最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯*(代"仿")抽提,无需酒精沉淀,样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚氯*(代"仿")抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A,可以获得不含RNA的高纯度总DNA,排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。
本试剂盒每次最多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多,反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA,每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA,每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA,每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量,样品用量最好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。
对于培养细胞的凋亡检测,通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。
试剂盒组份:
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套
注意事项:
1. 温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生,属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混匀后使用。
2. 第一次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇,洗涤液II需添加24ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
3. 本试剂盒需使用55℃或70℃水浴,请提前作好准备。
4. 除特别说明外,每次Vortex应控制在5-10秒左右。
5. 本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
6. 废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
储存条件:室温,有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)
YT131型Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒说明书关键词:Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒,YT131,Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
·兔抗CDK6抗体
编号:YT702
英文名称:CDK6 Rabbit Polyclonal Antibody
规格:50μl
本品为来源于兔的抗CDK6的多克隆抗体。
宿主:兔
克隆性:多克隆抗体
用途:WB,IHC,ICC, IF
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
分子量:37KDa
推荐稀释比例:WB(1:1000),IF(1:100),IHC(1:100),ICC(1:100)
About this Antibody | |
Name | CDK6 Rabbit Polyclonal Antibody |
Category | Polyclonal antibody(pAb); Primary antibody |
Isotype | IgG |
Purification | Peptide affinity purified |
About the Immunogen | |
Immunogen | This antibody is produced by immunizing rabbits with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to CDK6. |
Gene ID | 1021 |
SwissProt | Q00534 |
Synonyms | PLSTIRE |
Category | Cell Cycle / Checkpoint Control |
Background | CDK6 protein contains a catalytic core composed of a serine/threonine domain.This protein also contains an ATP-binding pocket, inhibitory and activating phosphorylation sites, a PSTAIRE-like cyclin-binding domain and an activating T-loop motif. CDK6 is involved in a positive feedback loop that activates transcription factors through a reaction cascade. CDK6 is important for the control of G1 to S phase transition. However, in recent years, new evidence proved that the presence of CDK6 is not essential for proliferation in every cell type, the cell cycle has a complex circuitry of regulation and the role of CDK6 might be more important in certain cell types than in others, where CDK4 or CDK2 can act as protein kinases compensating its role. |
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