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动力-硝酸盐培养基(B法)

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  • BD-0278-2
  • 2025年07月13日
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    • 保存条件

      2—25℃

    • 保质期

      一年

    • 英文名

      motility nitrate medium

    • 库存

      50

    • 供应商

      泽叶生物

    • 规格

      250g

    动力-硝酸盐培养基(B法)
    英文名称:motility nitrate medium
    产品规格:250g
    产品用途: 用于产气荚膜梭菌的动力和硝酸盐还原试验
    用途:用于产气荚膜梭菌的动力试验
    成分(g/L)
    蛋白胨 5.0
    牛肉浸粉 3.0
    硝酸钾 5.0
    琼脂 4.0
    磷酸氢二钠 2.5
    半乳糖 5.0
    动力-硝酸盐培养基(B法)pH值7.3 ± 0.1 25℃
    1、 液体培养基:把培养基配好,液体一般5mL就装试管,50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中,高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于,三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌,瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了,自己现做什么的也怪麻烦的。
    动力-硝酸盐培养基(B法)固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂,一般是100mL装瓶,或者是200mL装瓶(装500mL的三角瓶),灭完菌后,在培养基温度降到一定程度,培养基还呈溶液状态的时候,就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉,不然琼脂就凝固成块块了。当然,灭好菌后,也可以等到要用的时候再倒平板,倒之前微波炉加热,溶解琼脂,冷却到一定温度再倒就行。(建议如果以前从来没弄过固体培养基,也找个人替你操作几次)这部分的内容,可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
    2、冻干粉比较好保存,所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉,扔冰箱就行。都准备就绪以后,直接用500-1000uL的培养基溶解干粉,浓度高,接活率高。然后有几种方法可以选择:
    1).直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基(已经加了抗性)中,37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间,一般7,8个小时就能看见有没有长了。
    2).为了防止接菌量太少,导致菌体不生长,可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中,37C摇瓶培养,这个按说应该会长得比较快一点,因为通气量大。所以你可以都接上,看情况。
    3).还有为了防止污染,会直接取菌液在固体培养基上划线,这样长出来的是单菌落,根据菌落大小和形态,就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高,因为接菌量小,如果菌体活力稍弱,就容易完全不长。
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    • 微生物常规鉴定技术

      为亚硝酸盐、氨或氮气等。亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。 试验方法:临试前将试剂的A(磺胺酸冰醋酸溶液)和B(α-萘胺乙醇溶液)试液各0.2ml等量混合、取混合试剂约0.1ml、加于液体培养物或琼脂斜面培养物表面,立即或于10min内呈现红色即为试验阳性,若无红色出现则为阴性。 用α-萘胺进行试验时,阳性红色消退很快、故加入后应立即判定结果。进行试验时必须有未接种的培养基管作为阴性对照。α-萘胺具有致癌性、故使用时应加注意。 7、明胶(Gelatin)液化试验 有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白

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