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- 2025年07月11日
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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验HPLC‐SEC Characterization of Membrane Protein‐Detergent Complexes
Figure 29.5.4 Analysis of PDCs. The UV 280‐nm absorbance chromatogram of BSA in 0.34% (w/v) FOS12 (0.05 M Tris·Cl, pH 8.0, 0.1 M NaCl) is shown. A Sepax Nanofilm SEC‐500 column, 7.8 × 300 mm, was used
6xHis-tagged protein purification using Qiagen Ni-NTA Column
Buffers:Lysis Buffer (1 liter)50 mM NaH2PO4 6.90g NaH2PO4.H2O (MW 137.99g/mol )300 mM NaCl(up to 2M)17.54gNaCl(MW 58.44)or 60ml 5M10 mM Imidazole (up to 100mM)0.68g (MW 68.08 )10 mM BME (up to 20 mM)0.69 ml stock (14.4M )Adust pH to 8.0 using
.27. Column Buffers Make 500mls equivalent of base buffer: 10ml 1M Hepes pH 7.9 100ml 10% glycerol 5ml 10% NP40 (or 5.0ml 300mM Octyl glucoside) 200ml 0.5 EDTA ------- 115.2ml /5 = 23ml Base 1M KCl2.5M KCl dH20 for 0 KCL 46ml 0 0 154ml = 200
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