玻璃层析空柱，5.0x70cm，1根

一文搞定纯化实验 7 大常见问题！

」进行分离。 每种层析技术各有优势和特点，「组团出道」才能到达最佳的纯化效果。希望通过这份密卷，能够加速大家的纯化之路，由凝胶过滤、标签蛋白纯化、抗体纯化、离子交换、层析空柱等内容构成。 绝招一：凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式 可能原因：缓冲液或样品未进行过滤、蛋白沉淀或杂质残留、清洗不及时等引起层析柱滤膜堵塞；流速过快、流动相粘度（如乙醇等）过高、温度过低。 建议处理方法：首先卸柱子，确定是系统还是柱子堵了。如果是柱子堵了：参考说明书 CIP 操作进行清洁；更换层析柱顶端滤膜

SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质（图）

为剖面）(1)样品胶pH6.7 (2)浓缩胶pH6.7 (3)分离胶pH8.9 (4)电极缓冲液pH8.3图2 夹心垂直板电泳槽示意图 　　　　　　　　图3 凝胶模示意图1.样品槽模板 2.长玻璃板 　　　1.导线接头 2.下贮槽 3.凹形橡胶框 4.样品槽模板 5.固定螺丝 6.上贮槽 7.冷凝系统(1)样品浓缩效应 (a)凝胶孔径不连续性； (b)缓冲体系离子成分及pH值的不连续性； ●在pH6.7的凝胶缓冲体系中 前导离子或快离子：HCI解离出的氯根（CI

SDS－聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质

板 将混合后的分离胶溶液，用细长头的滴管加至长、短玻璃板间的窄缝内，加胶高度距样品模板梳齿下缘约1 cm。用1 ml注射器在凝胶表面沿短玻璃板边缘轻轻加一层重蒸水(约3–4 mm)，用于隔绝空气，使胶面平整。约30-60 min凝胶完全聚合，则可看到水与凝固的胶面有折射率不同的界线。 将上、下贮槽的蒸馏水倒去，将混合均匀后的浓缩胶溶液，用细长头的滴管加到长、短玻璃板的窄缝内(即分离胶上方)，距短玻璃上缘0.5 cm处，轻轻加入样品槽模板.在上、下贮槽中加入蒸馏水，但不能超过短玻璃板上缘。静置电泳