电泳试剂，核黄素-5'-磷酸，10g

利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化

质芯片检测。此外，肽芯片或基于质谱的方法[ 20，21] 也可以用于这方面。 我们在此介绍基于蛋白质芯片技术的蛋白磷酸化筛选方法和高通量确定蛋白激酶底物的方法。我们已成功地用这种筛选工具鉴定大麦酪蛋白激酶 2α ( CK 2α) 和不同的拟南芥丝裂原活化蛋白（MAP) 激酶 [23] 的新靶标。我们这个方法使用本书第 28 章详细描述的植物蛋白质芯片（见第 28 章）。在放射性【 γ33 磷】三磷酸腺苷存在的条件下，用可溶和具有活性的激酶孵育芯片。通过磷屏成像仪或 X 射线胶片检测到的放射性信号，对可能

补体C2的检测

，PBpH6.0/L：0.1m20ml；（8）5X10-5mol/L 12溶液 先配制10-2mol 12溶液，称取8.3g KI，0.25g 12，加4mlpH6.0,u=0.1的PBS，待I2溶解后，再加PBSl00ml。取10-2mol l2 5ml加PBS 995ml；（9）0.2mol磷酸 取1.35ml磷酸加水至100ml；（10）0.2mol乙醇胺 取乙醇胺1.22ml，加蒸馏水至100ml；（11）0.001%核黄素 称取核黄素10mg，加蒸馏水至1L，储于棕色瓶中，4℃冷藏；（12

植物质膜蛋白的提取和溶解

10 倍贮存液制成的 200 mmol/L KCl ( 在 1 L 中溶解 14.9 g) 与 50 mmol/L 的 EDTA ( 在 1L 中溶解 18.6 g) 混合在一起。-20°C 贮存数月。 ( 2 ) 均匀的介质：匀质化介质的最低要求，是存在一个渗透势从而减少细胞器的肿胀和破裂，缓冲液的 pH 7~8，从而减少水解酶活性和抵消液泡的低 pH，并且控制自由二价金属离子。β-甘油，原钒酸钠，邻菲罗啉构成磷蛋白磷酸酶抑制剂的混合物，该抑制剂被证明有利于维持细胞活性的特异性，如在 PM