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百奥莱博专业生产供应DNA拓扑异构酶I说明书,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:DNA拓扑异构酶I说明书
编号:BTN120414
品牌:百奥莱博
规格:100U
英文名:DNA Topoisomerase I
产地:国产|进口
产品简介:
DNA Topoisomerase I(DNA 拓扑异构酶 I)来源于小牛胸腺,与来源于原核生物的酶性质不同,在无Mg2+的条件下也具有活性。而且,原核生物的DNATopoisomerase I只作用超螺旋分子的负链,而本酶则能使来源于超螺旋分子正负链均形成松散型,DNA Topoisomerase I催化4种反应:
1. 使环状超螺旋分子的超螺旋解开。
2. 在单链环状DNA分子内形成绳结(Knotting)和解开绳结(Unknotting)。
3. 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
4. 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时,发生两个分子的连结反应(Catenation)或者逆反应(Decatenation)。
反应条件:
1X Buffer+BSA [50 mM KAc,20 mMTris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃)]。加入 100μg/ml BSA。37℃ 温育。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,35 mM (NH4)2SO4,50 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 7.5 @ 25℃
备注:
1. pBR322 DNA和φX174 DNA的RF I(超螺旋分子)用DNA Topoisomerase I反应后电泳,胶中含溴乙锭(EB)时,反应前后DNA带的位置不发生变化。这是因为由DNA Topoisomerase I作用而转换为松散型的DNA受EtBr的影响,再次变为超螺旋状态。因此,使用Topoisomerase I反应后,一般使用不含EB的琼脂糖凝胶电泳,电泳终了后再用EB染色。
2. 如果在10×添附Buffer中直接加入0.1%小牛血清白蛋白溶液,会产生大量的白色沉淀。因此,在反应液调制时需按以下顺序添加试剂:dH2O→10×反应缓冲液→0.1% BSA→底物DNA。
3. BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
单位定义:
1单位指在25μl反应体系,37℃条件下,15分钟内能催化超过95%的0.5μgpUC19RFI型(负超螺旋)DNA松弛所需要的酶量。DNA超螺旋化通过不含溴化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。热失活65℃20分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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DNA拓扑异构酶I说明书关键词:DNA Topoisomerase I,BTN120414,DNA拓扑异构酶I
·AP标记抗地高*(代"辛")抗体
编号:BTN131001
英文名称:Anti DIG Ab,AP
规格:10μL
产品简介:
本产品是AP(碱性磷酸酶)标记的,抗地*辛抗体,可用于免疫结合各种含有地*辛标记的生物分子,抗体带有AP标记,不需要二抗孵育,可直接用于显色。
运输及保存:
低温运输,4℃保存,有效期一年。
·Taq酶抗体
编号:BTN130815
英文名称:Taq Antibody
规格:250U/1000U
产品简介:
Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq 抗体,其与Taq 酶结合后抑制DNA聚合酶活性。使用本制品进行PCR扩增时,高温变性前抗Taq 抗体与Taq 酶结合抑制DNA聚合酶活性,能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq 抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性,DNA聚合酶活性恢复,达到Hot Start PCR效果。使用本制品无需特殊的抗Taq 抗体失活处理,可以在常规PCR反应条件下使用。其特点是:Hot Start PCR法进行DNA扩增。
活性定义:
Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合,25℃,10 min温浴后,在55℃,10 min条件下抑制90%以上的1 U 的Taq DNA Polymerase 活性的Taq Antibody量定义为1 U。
纯度:
1.10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA-Hind III在37℃或70℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.10 U 的Taq Antibody和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃或70℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA在37℃或70℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
4.10 U的Taq Antibody和1μg的16S,23S rRNA在37℃或70℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
5.35Cycles的PCR反应条件下,无Mouse Genomic DNA的污染。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
DNA拓扑异构酶I说明书关键词:DNA Topoisomerase I,BTN120414,DNA拓扑异构酶I
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