YT897型细胞活力检测试剂盒(化学发光法)多少钱

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名称：YT897型细胞活力检测试剂盒(化学发光法)多少钱
品牌：百奥莱博
编号：YT897
规格：100次|500次
英文名：Luminescent Cell Viability Assay Kit
产地：国产|进口
本试剂盒是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而来定量检测活细胞数目的试剂盒。本试剂盒的性能和用途与Promega公司的同类产品基本相同，对于相同的细胞样品本试剂盒的发光效果更强一些。

本试剂盒比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的检测试剂与培养细胞等体积混合，反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液。并且化学发光非常稳定，在反应开始后的10分钟内无显著变化，30分钟内的下降不超过10%。

本试剂盒不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量筛选检测。

本试剂盒线性范围广，检测灵敏度高。用96孔板进行检测时，本试剂盒在0-50,000个细胞/孔的细胞密度范围内有良好的检测效果，并且在仅有几百个细胞时仍有良好的线性关系。当细胞数量仅为50个/孔时，发光强度可达空白孔的5倍左右。

ATP，作为最重要的能量分子，在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标，也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子，并和活细胞数目成良好的线性关系。因此，ATP含量能很好地反应活细胞的数目，即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。

本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参考下图。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应，ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目，而ATP含量和发光强度成正比，这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。



对于96孔板，我们推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂，总体积为200μl，此时本试剂盒可以进行100次检测。对于384孔板，我们推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂，总体积为50μl，此时本试剂盒可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测，但细胞培养液和检测试剂体积的比例必须为1:1。

注意事项：
1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，第一次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。
2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。
3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。

储存条件：室温，有效期2年。

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·GFP抗体(小鼠单抗)
编号：YT781
英文名称：mouse anti-GFP monoclonal antibody
规格：>40次
本抗体是用全长的来源于水母的GFP (green fluorescent protein)作为抗原制备得到的抗GFP小鼠单克隆抗体。本抗体用于常规的Western检测，如果稀释比例为1:1000，则至少可以检测40次。

本GFP抗体可以识别GFP以及GFP的一些突变体例如EGFP(enhanced green fluorescent protein)。

GFP或其突变体EGFP等被广泛用于基因表达效率的检测，以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。本GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当的突变体，也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达的蛋白。

产品组份：
GFP抗体(小鼠单抗)————40μl
Western一抗稀释液————40ml

抗体参数：

免疫原物种：水母
免疫原：水母的GFP
克隆性：单克隆
宿主：小鼠
用途：WB,IP,IF
抗体识别位点：Full length GFP
同种型：IgG2a
GFP分子量：～27kD
推荐稀释比例：WB(1:200-1000),IP(1:100),IF(1:200)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·T4 DNA连接酶
编号：YT029
英文名称：T4 DNA Ligase
规格：40000U|200000U
本酶可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA 连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。

用途：T4 DNA Ligase常用于DNA*(代"片")段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源：本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义：One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5"-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit，以Weiss unit计，本产品共200单位。
纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规连接反应要求。
酶储存溶液：20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
10×Ligation Buffer：400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制：65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活；NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。


T4 DNA Ligase连接产物转化感受态后涂板LB平板的效果如上图，本品的连接产物转化感受态细菌后涂板获得的LB平板效果图。A. 双酶切后的载体自连过夜；B. 双酶切后的载体与待插入片段过夜连接。

注意事项：
1. 对于普通的转化大肠杆菌的操作，不必对连接产物进行纯化，连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时，通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯*(代"仿")抽提方法等纯化DNA，然后再进行电转。
2. 需进行平端连接或快速连接时，推荐使用百奥莱博的快速DNA连接试剂盒(YT028/D7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接，但效率较低。
3. 普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察，推荐先在65℃孵育10分钟使T4 DNA Ligase失活，以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。

储存条件：-20℃。

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