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北京百奥莱博科技有限公司
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200ml
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BL1097 DMEM(L)
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文献和实验钢网(200目)过目,再1000转/分离心10分钟,弃上清。沉淀悬于含15%胎牛血清和1U/L牛TSH的F-12培养基中,台盼蓝染色证明活细胞数大于95%,调整细胞浓度接种于培养板中(1ml/孔)。置于37℃的5%CO2孵箱中,每二至三天换一次液,至细胞融合成片后用于实验。 3.结果 猪甲状腺细胞培养24小时,镜下细胞贴壁,呈聚集生长,细胞呈圆形或椭圆形。 4.讨论 胰蛋白酶适于消化细胞间质较少的软组织如上皮组织、肝、肾等,对传代细胞也非常好。但消化纤维性组织或较硬的癌组织则效果较差。胶原酶对胶
其他组织成分的抗体,以致容易混淆。 (5)抗体分子上标记的荧光素分子太多,这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子,可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。 (6)荧光素不纯,标本固定不当等。 二、消除非特异性染色的方法 消除荧光抗体非特异性染色的方法应根据产生的原因采取适当的方法,常用的方法有以下几种: (一)动物脏器粉末吸收法 常用肝粉(猪、大白鼠或小白鼠),其次是骨髓粉、鼠脑粉和鸡胚粉等。每毫升荧光抗体中加入肝粉50~100mg,在离心管中充分混匀
的量 引物在PCR反应中的浓度一般在0.1~1μmol/L之间。浓度过高易形成引物二聚体且产生非特异性产物。一般来说用低浓度引物经济、特异,但浓度过低,不足以完成30个循环的扩增反应,则会降低PCR的产率。 (四)Taq DNA聚合酶的量 典型PCR反应混合物中,所用酶浓度为2.5U/μl,常用范围为1~4U/100μl。由于DNA模板的不同和引物不同,以及其它条件的差异,多聚酶的用量亦有差异,酶量过多会导致非特异产物的增加。 由于生产厂家所用兵配方、制造条件以及活性定义
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