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北京百奥莱博科技有限公司
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2×200ml
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北京百奥莱博专供的熊猫脾脏NK细胞分离液厂家,是一款高品质的细胞分离液产品,我公司提供各种物种的细胞分离产品,欢迎的您垂询。
名称:熊猫脾脏NK细胞分离液厂家
产地:国产|进口
编号:TH533
品牌:百奥莱博
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文献和实验细胞筛网置于培养皿中,取小鼠脾脏放置于筛网中,加入 5ml 达优小鼠淋巴细胞分离液,对脾脏轻轻进行研磨(注:此步操作要快,避免分离液蒸发); 2. 把悬有脾脏细胞的的分离液立即转移至 15ml 离心管中,随后在分离液上层轻轻覆盖 500-1000μl 的 RPMI1640 培养基(保持分离液与培养基分界明显); 3. 室温,水平转子 800g 离心 30 分钟,设置离心机为缓升缓降; 4. 离心结束后吸出淋巴细胞层(白膜层),加入 10ml RPMI1640 洗涤一遍细胞,250g 离心 10
基本方案: 由于所用Mab只能检测C57BL背景小鼠体内的NK1.1CD3- NK细胞,故本方案适用于C57BL/6或者C57BL/10(以及H2b 、d、q 同系小鼠)小鼠脾脏细胞。 清楚杂细胞所用的单克隆抗体的活性对本方案至关重要。单克隆抗体可以买到,并且其杂交瘤可以从ATCC得到,因此建议检测单克隆抗体的活性以保证实验成功。最佳补体和细胞浓度也需要通过实验确定。 实验材料: 1. C57BL/6或者C57BL/10小鼠 2. Tris/NH4Cl裂解
悬液。 对石蜡包埋组织应先切成若干 40~50μm 厚的蜡片,经二甲苯脱蜡至水后,再用前述方法制备单细胞悬液。 单细胞悬液的细胞数不少于 107个/mL。 二、流式细胞术实验操作大致分为以下五个步骤 取材:取手术或活检组织必须具有代表性,如取手术肿瘤组织,必须取肿瘤细胞生长旺盛部位;组织等标本必须在取材后保持样本的新鲜;一般在室温1个小时内处理好样本或及时用固定剂或低温对组织进行保存。 对细胞的待测生物化学成分进行荧光染色。 按照厂家提供的软件程序对样本进行获取、检测和存储。 依照软件提供的程序
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