彩色预染可曝光标准分子量蛋白Marker10-180

蛋白标准品（Marker）知识汇总

相关专题 蛋白Marker可分为：一、未预染的Marker即宽分子 量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。 在western blot 过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量

【求助】关于一种蛋白western的问题

验室经常用的转膜条件试一下，如果是实验室转膜的目的蛋白分子量比如40kd用2h，你可以用1个小时试一下，转完以后的SDS-PAGE胶可以放到考马斯亮蓝染液染一下，看看小分子量蛋白转的情况，一抗先按照说明书建议的最高浓度做，二抗按照你所在实验室一般使用的浓度用一下，ECL发光的时候先按照实验室常用的曝光时间看一下，如果片子出来没有东西，别着急，把曝光时间延长再试试，即使没有目的蛋白，曝光时间长的话杂带会出来，个人认为如果曝光时间很长比如10分钟或更长，杂带出来还没有目的条带，有可能是膜上面目的条带没有

Western 实验步骤

BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min