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- 文献和实验
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-20℃
- 保质期:
4℃四个周;如长期保存,2X Direct PCR Mix 须-20℃;勿反复冻融超过3次。
- 库存:
20
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格:
50T/100T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
2)转基因植物PAT基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)普通PCR反应流程
3)反应原理
4)PCR循环
5)与荧光定量PCR技术相比较主要缺点。
转基因植物PAT基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)荧光PCR简述
定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化,通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法:荧光探针法和荧光染料法。
荧光探针法检测原理:
荧光PCR如何实现实时监控的呢?
Ø PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分(检测器、激发光源、热循环模块)
Ø 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据,用于实验结果的分析
ARMS检测方法;1个SNP位点设计双管反应,含目的基因检测及内参检测双通道。
转基因植物PAT基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)技术特点:
Ø 准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
Ø 高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
Ø 快速:整个检测流程只需3小时。
Ø 简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
Ø 防污染
Ø 高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
大豆35S/SS PCR检测试剂盒50T
大豆NOS/SS PCR检测试剂盒50T
大豆PCR检测试剂盒50T
大豆RR PCR检测试剂盒50T
大豆RR/SS PCR检测试剂盒50T
大豆内源基因PCR检测试剂盒50T
大米BT63基因PCR检测试剂盒50T
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文献和实验一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
为探针进行杂交,所得X光片成像结果如图2右侧所示。成像斑点清晰,三张重复膜的结果一致,被检转基因植株全为阳性,阴性对照处未检出杂交信号,阳性对照明显。 3、讨论 PCR的方法用于检测转基因植物非常简便,但是其高灵敏度的特点容易导致假阳性结果,须经PCR产物克隆测序最终确认,如果用于鉴定大批量的转基因植物将会相当的费时费力。为此我们借助芯片点样仪样品量少、操作方便、重复性好等优点,采用快速、安全的生物素标记探针杂交法对转基因植物的PCR产物进行鉴定。为保证结果的真实性,一方面将PCR
聚合酶链式反应 (Polymerase Chain Reaction,PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。 无论定性还是定量分析,分析的都是 PCR 终产物。但是在许多情况下,我们所感兴趣的是未经 PCR 信号放大之前的起始模板量。例如我们想知道某一转基因动植物转基因的拷贝数或者某一特定基因在特定组织中的表达量。在这种需求下荧光定量 PCR 技术应运
荧光定量PCR的应用 分子生物学研究1、核酸定量分析。 对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等。2 、基因表达差异分析。 比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异 ( 如药物处理、物理处理、化学处理等 ) ,特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证3 、SNP 检测。检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体
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