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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
4℃四个周;如长期保存,2X Direct PCR Mix 须-20℃;勿反复冻融超过3次。
- 英文名:
SS-U
- 库存:
20
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格:
50T/100T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
2)猪链球菌通用型(SS-U)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)普通PCR反应流程
3)反应原理
4)PCR循环
5)与荧光定量PCR技术相比较主要缺点。
猪链球菌通用型(SS-U)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)荧光PCR简述
定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化,通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法:荧光探针法和荧光染料法。
荧光探针法检测原理:
荧光PCR如何实现实时监控的呢?
Ø PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分(检测器、激发光源、热循环模块)
Ø 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据,用于实验结果的分析
ARMS检测方法;1个SNP位点设计双管反应,含目的基因检测及内参检测双通道。
猪链球菌通用型(SS-U)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)技术特点:
Ø 准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
Ø 高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
Ø 快速:整个检测流程只需3小时。
Ø 简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
Ø 防污染
Ø 高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
志贺氏菌荧光PCR检测试剂盒50T
质型多角体病毒PCR检测试剂盒50T
致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒50T
中华鲟特定基因序列PCR检测试剂盒50T
猪、牛、羊布鲁氏菌病PCR检测试剂盒50T
猪布氏杆菌PCR检测试剂盒50T
猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测试剂盒50T
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文献和实验出来并混合在一起。象手动热启动方法一样,蜡防护层法比较烦琐,易于污染,不适用于于高通量应用。 Platinum DNA 聚合酶对于自动热启动 PCR 来说方便高效。Platinum Taq DNA 聚合酶的成分为复合有抗 Taq DNA 聚合酶单克隆抗体的重组 Taq DNA 聚合酶。此酶在常温下活性被封闭,要在 94℃- 95℃ 下加热数分钟才能够恢复酶活性。同经化学修饰用于热启动的 Taq DNA 聚合酶相比,Platinum 酶不需要在 94℃ 延时保温(10 到 15 分钟)以激活聚合
一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR密码子具有兼并性,如表22-4,单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的,但可以设计成对兼并引物,扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列可以改变,但核苷酸的数量应相同。兼并度越低,产物特异性越强,设计引物时应尽量选择兼并性小的氨基酸,并避免引物3’末端兼并,针对兼并的混合引物已成功地用于未知靶DNA的扩增、克隆和序列分析。现已成功地克隆了猪尿酸氧化酶基因、糖尿病相关肽基因和哺乳动物与禽类的嗜肝病毒基因。用脱氧
位点,那么,105个这样的分子中每个分子中会至少有一处损伤。相反,如果100bp的片段,每条链上仅有6处损伤,105个拷贝分子中将有许多分子没有任何损伤。这就是UV照射有一定的片段长度限制的原因。 (二)反应液污染 可采用下列方法之一处理: 1、DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室温反应30 min后加热灭活,然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是不需要知道污染DNA的序列; 2、内切酶法:选择识别4个碱基的内切
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