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- 泽叶生物
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- ZY-PCR-810
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
4℃四个周；如长期保存，2X Direct PCR Mix 须-20℃；勿反复冻融超过3次。
- 英文名：
IBV
- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
50T/100T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
2）乙型流感病毒（IBV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）普通PCR反应流程
3）反应原理
4）PCR循环
5）与荧光定量PCR技术相比较主要缺点。
乙型流感病毒（IBV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）荧光PCR简述
定义：在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化，通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法：荧光探针法和荧光染料法。
荧光探针法检测原理：
荧光PCR如何实现实时监控的呢？
Ø PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分（检测器、激发光源、热循环模块）
Ø 在扩增过程中，荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后，定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据，用于实验结果的分析
ARMS检测方法；1个SNP位点设计双管反应，含目的基因检测及内参检测双通道。
乙型流感病毒（IBV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）技术特点：
Ø 准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果一致性大于99%。
Ø 高灵敏：可检测低至10ng的人基因组DNA。
Ø 快速：整个检测流程只需3小时。
Ø 简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便。
Ø 防污染
Ø 高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光。
猪流感病毒通用型（SIV-U） 核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
猪戊型肝炎病毒（HEV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
猪戊型肝炎病毒（HEV）核酸检测试剂盒（RT-PCR法）
猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）核酸检测试剂盒（RT-PCR法）
猪流行性腹泻病毒（PEDV）核酸检测试剂盒（RT-PCR法）
钩端螺旋体（Lep）核酸检测试剂盒（RT-PCR法）
猪内源性逆转录病毒（PERV）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
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文献和实验可分为荧光探针和荧光染料。荧光探针又包括Beacon技术（分子信标技术，以美国人Tagyi为代表）、 TaqMan探针（以美国ABI公司为代表）和FRET技术（以罗氏公司为代表）等；荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料，非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ；饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等。 嵌合荧光染料法（SYBR GreenⅠ）SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料，与双链DNA非特异性结合。在游离
今天老师让我找一些比苯酚氯仿抽提法更简单的方法。通过专利文献和杂志，发现了一些简单的方法。 现小结一下---血清中病毒DNA的提取 一 煮沸法 从血清中提取病毒DNA，与其它方法比较，此法最为简单，并且很多文献都有报道 。 鲁艳芹等在一篇名为《乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法及专用试剂盒》专利(专利申请号为200610044679)中对六种方法提取血清中乙型肝炎病毒DNA的效率做了比较，得出结果是：NaOH裂解法最佳，其次是直接煮沸法，但该法不适合提取粘稠度较高的血样标本。说明
法和 Chelex 树脂法阳性检出率仅为吸附柱核酸纯化法的 52. 78% 和 55. 56%。在阳性标本中，同一标本的定量值也较吸附柱核酸纯化法低 1-2 lg 拷贝 /mL。 ②该系统用于检测的每份血清标本量较大。CAP-CTM 试剂盒用于检测的每份血清量达 650 uL，而国产 HBV DNA 检测试剂盒用于检测的血清标本量一般仅为 50-100 uL，但两者提取到的待测 HBV DNA 产物容积一般均为 50 uL。而且，由于反应管体积的限制，进行 PCR 检测时只能再取其中的 2-5 uL
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