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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
4℃四个周;如长期保存,2X Direct PCR Mix 须-20℃;勿反复冻融超过3次。
- 英文名:
LM
- 库存:
20
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格:
50T/100T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
2)单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)普通PCR反应流程
3)反应原理
4)PCR循环
5)与荧光定量PCR技术相比较主要缺点。
单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)荧光PCR简述
定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化,通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法:荧光探针法和荧光染料法。
荧光探针法检测原理:
荧光PCR如何实现实时监控的呢?
Ø PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分(检测器、激发光源、热循环模块)
Ø 在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后,定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据,用于实验结果的分析
ARMS检测方法;1个SNP位点设计双管反应,含目的基因检测及内参检测双通道。
单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)技术特点:
Ø 准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
Ø 高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
Ø 快速:整个检测流程只需3小时。
Ø 简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
Ø 防污染
Ø 高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
人细胞色素P450基因PCR检测试剂盒50T
人细小病毒B19PCR检测试剂盒50T
人线粒体DNA PCR检测试剂盒50T
人线粒体DNA11778位点突变PCR测定试剂盒50T
人雄激素受体基因多态性检测试剂盒50T
人血管生长因子VEGF-cPCR检测试剂盒50T
人亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变PCR测定试剂盒50T
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文献和实验定量的方法。 实时荧光定量 PCR 是目前确定样品中 DNA(或 cDNA) 拷贝数最敏感、最准确的方法。如果用于 RNA 检测,这被称为逆转录实时 PCR 即(Real-time RT-PCR)是实时 PCR 法,它是指对 DNA 或经过反转录(RT-PCR)的 RNA 通过聚合酶链式反应并实时监测 DNA 的放大过程,在扩增的指数增长期就测量扩增产物,因为扩增指数增长期测量值与特异 DNA(RNA)起始量存在相关性,从而实现定量检测。 RealTime PCR 的基本目标是精确
基因芯片技术具有快速多样、微型化和自动化等特点在生物医学领域广泛的应用。但由于其基本原理是基于核酸杂交技术,有着内在的缺陷,实验的敏感性和重复性都存在一定问题。核酸杂交较适合于检测基因的表达,不易检测基因组DNA的基因的重排,突变和缺失。而大多数肿瘤性疾病和一些遗传变异和表型的改变与后者有关。为了解决上述问题,我们将芯片技术与荧光PCR技术相结合,设立设计一种含有大量微反应池的PCR基因芯片,以期能快速、准确的对基因的重排,突变和缺失等基因变异进行检测。常规PCR反应产物的检测是电泳后观察获得
)法 由于UV照射的去污染作用对500bp以下的片段效果不好,而临床用于检测的PCR扩增片段通常为300bp左右,因此UNG的预防作用日益受到重视和肯定。 1、原理:在PCR产物或引物中用dU 代替dT。这种dU化的PCR产物与UNG一起孵育,因UDG可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键,可除去dU而阻止TaqDNA聚合酶的延伸,从而失去被再扩增的能力。UNG对不含dU的模板无任何影响。UNG可从单或双链DNA中消除尿嘧啶,而对RNA中的尿嘧啶和单一尿嘧啶分子则无任何作用
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