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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海信帆生物科技有限公司
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
科研
- 样本:
血清血浆及相关液体
- 规格:
96T
上海信帆生物在科研、中引进了一系列设备和仪器,为公司的迅速应用提供了便利条件,使达到优质高效,保证了产品的高质量。同时,公司严格遵守GMP管理的要求,从原料采购、、销售到售后服务,所有的活动均严格按照质检规程和岗位标准操作规程进行,并保留完整的记录。严格、规范的管理保证了公司产品质量稳定。
Elisa试剂盒样本处理及要求:
ELISA 的样本实验准备 在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当 天就进行 检测的样本,及时储存在 4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用, 有条件的,好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA实验中老师问题集锦:
☆★问:选择酶标仪注意事项?
☆★答:酶标比色仪简称酶标仪,通常指专用于测读 ELISA 结果吸光度的光度计。酶标仪的主要性 能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标 仪的读数一般可精确到 0.001,准确性为±1%,重复性达 0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强 光照射下,操作时室温宜在 15~30℃,使用前先预热仪器 15-30 分钟,测读结果更稳定。
☆★问:是否提供代测服务?
☆★答:购买我司ELISA试剂盒,可以提供免费代测服务。上海和南京地区的客户可以提供免费上门取样的服务,其他地方的老师可以把样本用EP管装好,编好号。放到泡沫箱子中,用干冰和冰袋寄送。我们是收到样本后7个工作日出实验报告。实验报告包括说明书,实验室用的仪器型号,数据,标曲等。
☆★问:实验中造成回收率偏高的原因?
☆★答:添加量不准确,精准的添加量。添加浓度不适合,添加合适的浓度。
取液吹干量多,准确的取液吹干。
取到其它相层液体,取需用相吹干。
复溶液未稀释或加入量少,正确的稀释复溶液。
☆★问:实验中出现假阳性或者假阴性的原因?
☆★答:水质原因,可以点复溶液验证,或者用纯净水。
实验操作原因,包括吸取到其它相吹干,离心不彻底,样本的污染,乳化未处理完全。可以准确的取样吹干,延长离心时间,更换样本,温浴(70℃)处理乳化现象。
仪器试剂原因,离心管未清洗干净。有机溶剂的影响,可以做试剂空白看影响结果。
衍生化试剂原因(长时间衍生化试剂变质)。
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文献和实验作用等方面具有重要意义。 1.3 CYP450酶及代谢表型研究方法 CYP450为一类含亚铁血红素蛋白的超家族,根据相关酶亚型在药物代谢中的重要程度,可将CYP450分为以下三类:(1)主要CYP450,包括CYP1A2、CYP2C9 、CYP2C19 、CYP2D6 和CYP3A4;(2)较主要CYP450,包括CYP2B6、CYP2C8和CYP3A5;(3)次要CYP450,包括CYP1A1、CYP1B1、CYP2A6、CYP2E1、CYP2J2和CYP4A11等。参与药物代谢的动物肝微粒
肝细胞的标志——醛缩酶 B mRNA 的水平,达到新鲜分离的人肝细胞 20% 的水平。相比 HepaG2 细胞,其白蛋白和触珠蛋白 mRNA 的表达水平比 HepaRG 细胞低,检测不到醛缩酶 B 的转录。二、药物代谢相关酶系细胞色素 P450(CYP)是最大的药物代谢酶蛋白超家族之一,其中参与人体肝药物代谢的主要有 CYP1、CYP2、CYP3 及 CYP4 家族。P450 酶易受多种内外源性物质的诱导或抑制,导致酶数量和活性改变,从而改变药代动力学,使药物活性物质累积导致毒性增强或降低其血
450 为一类含亚铁血红素蛋白的超家族,根据相关酶亚型在药物代谢中的重要程度,可将 CYP450 分为以下三类:(1)主要 CYP450,包括 CYP1A2、CYP2C9 、CYP2C19 、CYP2D6 和 CYP3A4;(2)较主要 CYP450,包括 CYP2B6、CYP2C8 和 CYP3A5;(3)次要 CYP450,包括 CYP1A1、CYP1B1、CYP2A6、CYP2E1、CYP2J2 和 CYP4A11 等。参与药物代谢的动物肝微粒体 P450 酶较为复杂,而人肝微粒体中参与药物
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