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北京百奥莱博科技有限公司
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200ml
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名称:小鼠外周血单个核细胞分离液价格
产地:国产|进口
编号:TH100
规格:200ml
品牌:百奥莱博
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文献和实验科镊子提起腹膜,用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS(勿扎到脏器),轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液,收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次,冲洗腹腔,可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数,并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项: 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞,且检测目的细胞非红细胞,先
,最后取 5μL 2000 倍稀释样本到 245μL 标准品&样本稀释液内,做 50 倍稀释,总共稀释 100000 倍; 每步稀释时,取液量不少于 3μL,稀释倍数不超过 100 倍。每步稀释都需混合均匀。 Q3:大小鼠采血容量? A3:根据实验方案所需采血量的要求,我们可以选择不同的采血方式。 鼠尾采血法: 取血量较少时,采用此方法。通常选择剪断尾巴进行采血。亦可不剪尾,用 7-8 号注射针头刺入尾静脉采血。 小鼠每次可取血 0.1mL,大鼠每次可取血 0.2~0.4mL,可多次反复采血
细胞,计数,并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项: 一个正常大小的脾脏,根据经验大约可以得到4×107个细胞,实际细胞数以计数结果为准。 淋巴细胞约占小鼠脾脏裂解红细胞后总细胞量的60%~70%。 未染色的脾脏细胞样本,可以在荧光通道中看到少量(大约百分之零点几)非特异性信号。 若没有组织研磨棒,也可以用注射器里面的推杆替代。用推杆前端的橡皮垫研磨脾脏。 收集的脾脏细胞如需进一步培养,取小鼠脾脏时需置于无菌操作台上。如果只是做普通的流式实验,则可以不考虑无菌环境。 PBS可以用细胞染色染冲液
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