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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海信帆生物科技有限公司
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
人,大鼠,小鼠
- 样本:
血清,血浆及相关液体
上海信帆生物在科研、中引进了一系列设备和仪器,为公司的迅速应用提供了便利条件,使达到优质高效,保证了产品的高质量。同时,公司严格遵守GMP管理的要求,从原料采购、、销售到售后服务,所有的活动均严格按照质检规程和岗位标准操作规程进行,并保留完整的记录。严格、规范的管理保证了公司产品质量稳定。
Elisa试剂盒样本处理及要求:
ELISA 的样本实验准备 在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当 天就进行 检测的样本,及时储存在 4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用, 有条件的,好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA实验中老师问题集锦:
☆★问:选择酶标仪注意事项?
☆★答:酶标比色仪简称酶标仪,通常指专用于测读 ELISA 结果吸光度的光度计。酶标仪的主要性 能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标 仪的读数一般可精确到 0.001,准确性为±1%,重复性达 0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强 光照射下,操作时室温宜在 15~30℃,使用前先预热仪器 15-30 分钟,测读结果更稳定。
☆★问:是否提供代测服务?
☆★答:购买我司ELISA试剂盒,可以提供免费代测服务。上海和南京地区的客户可以提供免费上门取样的服务,其他地方的老师可以把样本用EP管装好,编好号。放到泡沫箱子中,用干冰和冰袋寄送。我们是收到样本后7个工作日出实验报告。实验报告包括说明书,实验室用的仪器型号,数据,标曲等。
☆★问:实验中造成回收率偏高的原因?
☆★答:添加量不准确,精准的添加量。添加浓度不适合,添加合适的浓度。
取液吹干量多,准确的取液吹干。
取到其它相层液体,取需用相吹干。
复溶液未稀释或加入量少,正确的稀释复溶液。
☆★问:实验中出现假阳性或者假阴性的原因?
☆★答:水质原因,可以点复溶液验证,或者用纯净水。
实验操作原因,包括吸取到其它相吹干,离心不彻底,样本的污染,乳化未处理完全。可以准确的取样吹干,延长离心时间,更换样本,温浴(70℃)处理乳化现象。
仪器试剂原因,离心管未清洗干净。有机溶剂的影响,可以做试剂空白看影响结果。
衍生化试剂原因(长时间衍生化试剂变质)。
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文献和实验在一般的概念里,ELISA技术的可操作性强,不需复杂设备,甚至完全手工加样、洗板和肉眼判读结果,便可完成该技术的操作。随着人们对质量控制意识的加强,尽可能做到最低限度的减少系统误差,以及减少劳动强度等观念的不断改进,解决ELISA技术中加样、温育、洗板及判读结果过程的系统误差问题及高效率运作问题导致了自动化概念的形成。ELISA技术的加样、温育、洗板及判读结果过程的科学地、有机地、系统地结合,尽可能地减少各环节的人为因素的影响,便成为自动化ELISA技术的理论基础。 在自动
,分析脾细胞和肠系膜淋巴结T细胞的增殖,细胞因子产量,脑组织囊肿数。 6. 体液反应 用ELISA滴定血样中特异性抗原IgG、IgG-1、IgG-2a、IgG-2b和抗体IgG-3。抗原特异性抗体滴度检测,最高稀释度的倒数,在同样稀释度下比对照组高2倍的吸光度。结果用对数表达。肠分泌物中分泌型IgA(IgAs)用免疫印迹法检测,感染小鼠的血清和肠分泌物和1E5 mAb 作为阳性对照。 7. 抗原刺激细胞增殖反应 出生后6周,在无菌条件下,采集脾和肠系
。该系统以多种产品形式提供,包括T7Select噬菌体克隆试剂盒,包含OrientExpress™ cDNA合成的试剂盒以及T7Select噬菌体克隆系统。另有12种预制人正常组织和病理组织来源的cDNA文库提供,这些文库都是用T7Select10-3载体构建的。T7噬菌体展示系统与M13系统有什么区别? M13和T7噬菌体最大的区别就在于成熟病毒从宿主细胞中释放的方式不同。M13噬菌体在周质中组装,必须经细胞膜分泌;而T7在细胞质中完成组装后直接从细胞裂解出来。因此,任何抑制分泌过程的蛋白和多肽
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