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- 2025年07月11日
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BestBio贝博
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100T
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文献和实验【求助】P53的翻译后修饰都有哪些？ 怎样验证其修饰后与靶标启动子的结合活性的变化？
蛋白质功能的一个主要机制，p53在多个位点上可被磷酸化、顺-反异构化、乙酰化、泛素化、甲基化、糖基化等修饰，从而显示其生物学重要性。这种显示细胞或组织特异性并依赖细胞周期位置的多重修饰，是一种复杂的调节方式，随着细胞对DNA损伤、增殖、老化等产生的细胞信号的反应而发生波动。 磷酸化修饰 P53的磷酸化在多数情况下与蛋白质的稳定性有关。p53 N-末端的三个位点Ser15、Thr18、Ser20磷酸化后，使p53和其主要的负性调节因子MDM2之间的相互作用消失，而和乙酰转移酶
于基因转录。 迄今为止，已鉴定的人HAT可分为以下五大类 (1)Gcn5相关N―乙酰基转移酶(GNAT)超家族：GNAT超家族成员在几个同源区域和乙酰化相关基序存在相似性。决定该超家族的4个序列基序C、D、A、B的功能尚未完全阐明。基序C仅存在于GNAT家族的大多数HAT中，而基序A则高度保守，也存在于其他HAT家族，如MYST家族。另外，该家族还包含一个Arg／Gin―X―X―Gly―X―Gly／Ala片段，主要功能为特异性乙酰CoA底物的识别和结合。 (2)P300／CBP
于该检测试剂盒对目标修饰的特异性） 测定广泛物种（包括哺乳动物细胞/组织、植物和细菌）的去甲基化酶活性 具有简单比色或荧光读数的快速微孔板版本 3 小时内即可提供数据 表征组蛋白乙酰化通路 提供可分析总体活性以及 H4 特异性的 HAT 活性的试剂盒。这些检测试剂盒可以检测 HAT 催化乙酰基从乙酰辅酶 a 供体转移到组蛋白肽的过程，该过程会生成乙酰化肽和 CoA-SH。然后通过 比色法或荧光法测定 CoA-SH 副产物： 比色法 - CoA-SH 作为生成 NADH
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