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- KALANG
- 中国大陆
- KL100825
- 2025年07月15日
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冷藏
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长期
- 英文名：
Auto-induction Medium
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大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
200mL
自诱导培养基(lac启动子)
英文名：Auto-induction Medium编号：KL100825
规格：200mL
产品及特点:
本产品是本产品是在pET专用生长培养基的基础上开发而成的，它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制，实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
本产品具有下列特点:
1.本产品自动诱导表达，不需要添加任何IPTG或相关诱导物，节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程，尤其适合大规模筛选。
3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.极大提高外源蛋白的表达量，最高可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器（如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等）兼容。
6.本产品即开即用，非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统，如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
运输及保存:常温运输及保存，有效期两年。
自备试剂:蒸馏水
使用方法:
一:培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25 mL溶液B全部加入到200 mL的溶液A中即得自诱导培养基。注意:必须严格无菌操作，否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用，可以冻存在-20℃。
二:培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌，如BL21（DE3），涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中（需要加入适当浓度的抗菌素），37℃培养过了夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中，37℃培养直到菌液浑浊但不饱和（一般需要6-8小时）。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中（如果自诱导培养基体积是100 mL，则加入100 uL菌液），同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中，如果使用卡拉霉素，其终浓度比一般的培养基高，需要100 ug/mL。由于本方法所得菌液密度大，故需要大量氧气，因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的，这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过了夜，或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度（对温度诱导型启动子）。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
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