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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
六个月
- 英文名:
Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×)
- 库存:
445
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖磷酸酶抑制剂混合物(100×)优惠促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:磷酸酶抑制剂混合物(100×)优惠促销
编号:SY0311
英文名:Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×)
产地:国产|进口
规格:1ml
细胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡等许多重要的生物学活动的调控开关。因此在蛋白研究过程中,对磷酸酶作用的控制具有重要的生理意义。组织和细胞中充斥着大量的酶原,经裂解后释放到体外的酶原被充分激活从而开始消化周围的蛋白。因此,在研究蛋白磷酸化途径和信号通路的过程中保护蛋白磷酸化状态是极其关键的。
本品是多种磷酸酶抑制剂的特殊混合物,广谱抑制非特异性的酸性/碱性磷酸酶以及特异性的蛋白酪氨酸磷酸酶,丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(PPA,PP2A)等。本品是以白色冻干粉的形式供货,适用于动物组织,细胞提取物等样品。
使用方法
收到产品后,低速离心使得冻干粉聚集在管底。之后加1ml蒸馏水充分溶解形成100×存储液。按1:100的比例加入适量的提取液内混匀,再进行总蛋白的提取。或者根据实验目的,组织和细胞的特殊性,首先进行摸索和优化工作体系。
储存条件:-20℃,有效期六个月。
注意事项
1)100×存储液建议分装冻存,避免反复冻融。工作液需现配现用。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套进行操作。
3)在产品的保存过程中可能会因受潮引起产品变成黄色,该变化系产品中加入的冻干物质的原因,不会影响产品性能,请放心使用。
欲了解更多磷酸酶抑制剂混合物(100×)优惠促销的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,19:1
编号:SY0342
英文名称:30% Acryl/Bis Solution, 19:1
规格:500ml
Acr-Bis常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(N,N’-methylene bisacrylamide,简称Bis )在催化剂的作用下,通过自由基引发聚合反应,形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。其孔径大小由聚合链的长度和交联度(交叉连接的程度)所决定。
聚合链的长度与丙烯酰胺的浓度有关,交联度由Acr 与Bis的相对比例决定,调节单体丙烯酰胺与交联剂(Bis)的浓度比例,可形成具有不同交联度的网状聚合物。其中Bis的浓度愈低,凝胶的孔径愈大,适用于分离较大的分子;Bis的浓度愈高,网孔越小,分辨率越高,越有利于分离较小的分子。
30% Acr-Bis(19:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为19:1。
30% Acr-Bis(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。
30% Acr-Bis(37.5:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为37.5:1。
储存条件:4℃,避光。
·2×PCR Master Mix(不含染料)
编号:SY0026
英文名称:2×PCR Master Mix(No dye)
规格:1ml
2×PCR Master Mix(No dye)是即用型的常规PCR预混合溶液,含有Taq DNA Polymerase,dNTP混合物,MgCl2以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。
体系中不含有溴酚蓝染料,其中的保护剂使得Master Mix 4ºC条件下长期放置,或经过反复冻融后仍可维持酶的活性以及产品的稳定性。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子作为模板/引物,在74ºC,30min内摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测:50μl体系中,以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的360 bp条带。
稳定性检测:2×PCR Master Mix分别在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3个月、25 ºC放置1个月后,菌落PCR扩增1.2kb片段。电泳结果显示2×PCR Master Mix具有非常好的稳定性。

磷酸酶抑制剂混合物(100×)优惠促销关键词:磷酸酶抑制剂混合物(100×),Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×),SY0311
·腔肠素h
编号:SY0235
英文名称:Coelenterazine h
规格:1×500μg
本品为粉末形式供应的腔肠素h(Coelenterazine h),是海肾荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)等多种荧光素酶的作用底物,其发光强度比天然腔肠素高10倍以上,适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子,可用于检测活细胞中钙离子浓度。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点,
1)能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂;虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。
图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
英文别名:2,8-Dibenzyl-6-(p-hydroxyphenyl)-imidazo[1,2a]pyrazin-3-(7H)-one; 2-Deoxycoelenterazine; CLZN-h; h-CTZ
CAS:50909-86-9
分子式:C26H21N3O2
分子量:407.48 g/mol
熔点:142℃±2℃(dec)
UV:l max: 433 nm ± 2 nm
外观:浅黄色至橘色粉末
溶解性:溶于甲醇或者乙醇,不可溶于DMSO
纯度:>99%(TLC)
结构:
运输和保存方法:冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存,最好保存在惰性气体下以避免接触空气。
注意事项
1)腔肠素h粉末或者储存液最好使用惰性气体-氮气或氩气,在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入,也可能造成腔肠素h氧化失活,使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
磷酸酶抑制剂混合物(100×)优惠促销关键词:磷酸酶抑制剂混合物(100×),Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×),SY0311
海藻酸 Sodium butyrate 9005-32-7
K-卡拉胶 4-Hydroxycoumarin 11114-20-8
SJ0405 2ipN6-异戊烯基腺嘌呤
25249-54-1 PVPP 聚乙烯聚吡咯烷铜
BTN131057 钴柱介质 Co-Agarose Resin
D-阿拉伯糖 2-Naphthyl phosphate sodium salt 10323-20-3或28697-53-2
BTN81026 一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法) One-Stop Biotin-Based TUNEL Kit
ARB13344 牛β-乳球蛋白(β-lActoglobulIn)含量检测
PY08-001 营养琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于细菌总数测定,该培养基不含糖,也可用于菌种的保存、传代及纯培养。
9035-81-8 Trypsin inhibitor 胰蛋白酶抑制剂
HC0044 离心管
BL1135 JM109感受态细胞
溴百里酚蓝钠盐 Dopamine hydrochloride 34722-90-2
ARB10788 人抗中性粒细胞抗体(ANA)ELISA检测服务 Human anti-neutrophil antibody,ana ELISA KIT
北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购磷酸酶抑制剂混合物(100×)优惠促销。
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