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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
二年
- 英文名:
Donkey Anti-Goat IgG,HRP Conjugate
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
60 μL
本抗体是驴抗山羊IgG二抗,是经亲和纯 化并标记辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase),与所有的IgG 亚类反应。 当使用工作稀释度为1:10,000 的该抗体 进行Western blot 显色实验时,检测结 果表明该抗体可与山羊和绵羊的IgG 反 应,而与兔和小鼠IgG 以及PC12 细胞提 取物有极小的交叉反应。它可检测100ng 山羊IgG,而背景极低。
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文献和实验1. 8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶,加入1 ml双蒸水溶解,液体呈棕色。 2. 放入一个磁力搅拌子,电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml,室温下继续搅拌40 min,液体呈现草绿色。 3. 将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中,4 oC 对1 mM pH 4.4的NaAc透析过夜,中间换液3-4次,每次300 ml,溶液最终呈浅棕色。 4.
辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序 1.组织切片脱蜡处理等同前; 2.流水冲洗5分钟,3%H2 O2 孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶,避免假阳性); 3.PBS漂洗3次,每次5分钟; 4.1%牛血清白蛋白孵育,室温20分钟,移去多余液体; 5.加入PBS稀释的辣根过氧化物酶―凝集素,置湿盒内孵育。室温1.5小时; 6.PBS漂洗3次.每次5分钟; 7.呈色 DAB
的活性。PBS洗3遍。 五.封闭 3-5%BSA或者1-2%FBS封闭30min 六.除去封闭液液,每张切片加1滴或50μl的第一抗体, 4℃过夜。 抗体稀释液:1%FBS溶液(可以加0.01%叠氮钠) 七.洗一抗:PBS洗3遍,每次5min。 八.孵二抗2h(室温)FITC标记山羊抗兔二抗;Cy3标记驴抗山羊二抗 九.洗二抗 PBS洗3遍,每次5min 十.擦干标本边缘水分,加DAPI(1ug/ml)5min; 十一.PBS洗3遍,每遍3min,加mouting(sigma M1289),盖盖玻片
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