- ¥590
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY140436-250
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Nonprotein Western Blocking Solution
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
250 mL
本产品为即用型免疫印迹膜非蛋白型封 堵缓冲液，其不包含任何蛋白质，不会 产生使用蛋白类封闭剂时出现的诸如 交叉反应和非特异性结合等问题，在 保证有效的封闭效果的同时，还只具 有极低的背景。
本产品具有下列特点：
1. 高信噪比，得到最佳的灵敏度。
2. 本 产 品 包 括 A 型（Tris 缓 冲 盐 溶 液，pH7.4，含 Kathon 杀菌剂）和 B 型（ 磷 酸 盐 缓 冲 液，pH7.4， 含 Kathon 杀菌剂）。
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文献和实验BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
ml移液管移取10ml样液移入半微量式定氮仪的反应室中，加入20ml 1∶1的氢氧化钠溶液蒸馏10 min，余下的步骤按照测定粗蛋白的方法进行操作，得出样品所消耗的盐酸的体积为V1（ml）。同时作空白滴定可得消耗的盐酸的体积为V0，设所称样品的质量为M（g）。 5、非蛋白氮的粗蛋白质计算公式 CP(%)＝（V1-V0）×C×O.14×6.25/M (责任编辑：大汉昆仑王)
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