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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
参见说明书
- 保质期:
长期
- 英文名:
One Step Seamless Cloning Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
20次
一步法无缝克隆试剂盒(单片段克隆)
编号:KL337规格:20次
英文名:One Step Seamless Cloning Kit
产品介绍:
一步法无缝克隆试剂盒不依赖于T4连接酶,不受载体和目的片段的酶切位点限制,而直接用重叠片段重组的方法,采用特殊的酶组合可以将任意方法线性化后的载体和与其两端具有16-25bp重叠区域的PCR片段定向重组连接,可以30分钟内实现A末端或者平末端PCR产物片段高效定向无缝克隆至载体的任意位点。。
产品储存:
储存:-20℃,避免反复冻融。
产品特点:
1. 30分钟可以将一个50bp-15kb PCR扩增片段(平末端、A末端均可)克隆插入任意载体的任意位置。
2.不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制,可以在任意位点进行克隆。
3.无缝克隆,插入点不会引入不需要的碱基序列。
4.不依赖于连接酶及磷酸酶,高效,准确,克隆阳性率可达95%以上。
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文献和实验上篇我们对经典分子克隆技术和无缝组装克隆技术进行了比较,经典分子克隆兜兜转转、如琢如磨,而无缝组装克隆技术却能做到操作简单和方便快捷。那它究竟是如何实现的呢?本期我们就来具体聊聊无缝克隆的四步致胜奇招。 无缝组装克隆之 Step 123——带你飞,把还在用传统方法“琢磨”的他甩在后面 基于同源序列的无缝组装克隆技术,关键是利用 PCR 引物,在目标片段两端引入与线性化载体两端同源的一段序列。基本策略是 选定插入外源片段的位置,以此线性化载体 设计包含线性化载体两端序列和目标片段两端序列的引物
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Blunt PCR克隆乃利用传统T4连接酶方法,但载体和Topo平端的一样,含ccdB基因,所以同样可降低菌落背景,易于筛选。 表10 PCR克隆试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method Product
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