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-20℃
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12个月
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大量
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康朗生物
- 规格:
20次
Gateway入门克隆构建试剂盒
本试剂盒采用了世界最先进的定向拓扑异构酶克隆技术可以在5分钟内将待表达目的基因(高保真酶扩增的平末端片段)一步法定向克隆到Gateway入门载体,得到的入门克隆可以和各种Gateway目的载体通过LR重组反应,生成表达克隆。方便目的基因在原核/哺乳动物细胞/酵母/昆虫表达系统切换表达。
试剂盒组份:
Gateway入门载体(30ng/μl)—————20μl
10×Enhancer-———————————20μl
产品特点:
1. 简单快速,加入待表达基因片段室温仅需5分钟便可完成入门克隆构建。
2. 定向克隆技术,超过90%插入为正确方向插入,减少克隆筛选耗费的时间。
3. 构建的入门克隆不含原核表达Shine-Dalgarno(SD)序列,因此构建原核表达克隆时应选择带SD序列的目的载体进行Gateway LR重组。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
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文献和实验纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 目的基因克隆进入门载体后,可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway利用了位点特异重组,所以在构建入门载体后,不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆,就可以多次使用它,转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体(目的载体)。 此外,由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变,因而您不必再为新的表达克隆测序担心。在使用每一种新的表达系统时,将会节省您更多的时间。 二、一项
。当基因在目的表达载体 之间快速简便的穿梭时,还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway也有助于进行带不同数目纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 目的基因克隆进入门载体 后,可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway利用了位点特异重组,所以在构建入门载体后,不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆,就可以多次使用它,转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体(目的载体)。
Gateway也可以被视为一种克隆操作平台:把目的基因克隆到入门载体(Entry Vector)后,就不用依赖限制性内切酶,而靠载体上存在的特定重组位点和重组酶,高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体(Destination Vector,目的载体)上。Gateway的原理也是建立在噬菌体DNA定点整合到细菌宿主基因组上。在噬菌体和细菌的整合因子(INF、Int)的作用下,lambda的attP位点和大肠杆菌基因组的attB位点可以发生定点重组,lambda噬菌体DNA整合到大肠杆菌的基因
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