- ¥990
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY12-210
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-80℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
WB600 Bacillus subtilis Strain
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
1mL
WB600菌株是来源于BS168的变异，是蛋 白酶缺陷型菌株，敲除了6个蛋白酶基因。 含红霉素抗性基因。转化方法简单、便捷， 金黄色葡萄球菌带有抗性基因的质粒可作为 其载体，菌株没有致病性。细胞壁的组成简 单，只含有肽聚糖和磷璧质，因此在分泌的 蛋白质产品中不会混杂有胞被内毒素（热源 性脂多糖）。蛋白纯化简单，多用于蛋白表 达。
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文献和实验、遗传操作相对困难、外源蛋白有时得不到有效的表达等等。但AtaGenix却能成功避免以上问题使外源目标蛋白在枯草芽孢杆菌表达系统中有效表达，这主要得益于以下三个方面的优势： 1 丰富的表达宿主 由于枯草芽孢杆菌没有明显的密码子偏爱性，表达外源蛋白时无需对DNA序列进行优化。在不同宿主中表达时，蛋白表达情况可能有差异。在AtaGenix拥有的多种枯草芽孢杆菌表达宿主中，1012 wild type宿主菌是最常用到的，可作为胞内和胞外表达的通用菌；168
将离心后上清转移至吸附柱中，12000 rpm离心30-60 s，倒掉收集管中的废液； 07 可选：向吸附柱中加入500 μl Buffer PD（富含蛋白酶），12000 rpm离心1 min，倒掉收集管中的废液； 注意：此步对富含内源核酸酶的宿主菌（endA+）是必须的，对于endA-宿主菌可省略。 08 向吸附柱中加入600 μl Wash Buffer（加入无水乙醇），12000 rpm离心1 min，倒掉收集管中的废液； 09 重复步骤
产物双酶切后回收，在T4DNA连接酶作用下连接入载体。（三）获得含重组表达质粒的表达菌种1、将连接产物转化大肠杆菌DH5α，根据重组载体的标志（抗Amp或蓝白斑）作筛选，挑取单斑，碱裂解法小量抽提质粒，双酶切初步鉴定。2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确，进入下步操作。否则应筛选更多克隆，重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。3、以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。（四）诱导表达1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB（含Amp50μg/ml）中37℃过夜培养。2、按1∶50比例稀释
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