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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
SP6 in vitro Transcription Kit
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50次
本试剂盒是基于沙门氏菌噬菌体SP6 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒,它利 用含有SP6启动子的模版DNA,以NTP为底物,从SP6启动子下游开始合成与模版 DNA中一条链互补的RNA,简单快速获得大量的RNA分子。本产品具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需提供含SP6启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验, 不需要单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液,减少加样次数,避免了操作误差,增加了可重复性。
3. 模版DNA可以是线性化的质粒DNA,也可以是PCR扩增产物。
4. 可以合成的RNA的最佳长度在20 nt到5000 nt之间。
5. 产品配方经过精心优化,每 μgDNA模版可以合成2-6 μg RNA。
6. 得到的RNA可以用于RNA 结构研究、核酶生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质 相互作用、反义技术、SELEX 技术和 RNA 干扰(RNAi)等实验。
SP6体外转录试剂盒使用及效果
将2×转录预配液10 μL与用户自备的DNA模板和1 μL SP6 RNA聚合酶混合, 补水到20 μL,混合后37℃ 保温1到2小时即可。
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文献和实验。) 使用不同的聚合酶 通常用于体外转录的三种 RNA 聚合酶可以相互不同地转录给定的模板。当转录不能完成时,可以充分利用这种转录给定模板序列的不同能力。改变转录模板前面的聚合酶启动子序列是一种劳动密集型修复,因为它可能需要设计 PCR 引物或亚克隆。Ambion 具有可简化过程的载体和引物。pTRIPLEscript 系列载体具有串联排列的 SP6、T7 和 T3 启动子,这些载体特别适用于亚克隆转录模板。或者,Ambion 的无克隆启动子添加试剂盒 Lig'nScribe 可用于改变可 PCR 扩增
利用BLOCK-iT8482; RNAi技术,进行简单、高效的RNAi分析!
(siRNA)可以很容易地、特异地降解互补靶mRNA。 当前常用的用来在哺乳动物细胞中启动RNAi反应的方法包括以下几种:转染合成的siRNA寡核苷酸(siRNA oligonucleocides),体外转录后通过Dicer酶将长的双链RNA(dsRNA)切割成Diced siRNA (d-siRNA),或者导入能够表达siRNA的载体。在这些方法中,只有体外转录和切割(Dicing)能够形成d-siRNA 双链体的复杂池,继而经过转染进入细胞。这一过程可以很快产生结果,而无需再花费时间设计和检测
注意RNAse的防污染操作。 制备RNA探针的常用方法是构建含探针标记模板的重组质粒,将克隆子的转录区下游进行限制性酶切线性化后,进行体外转录的探针合成反应。当然,采用的质粒上必须含有SP6,T3或T7 RNA聚合酶的启动子序列。体外转录法合成的探针量很大,通常情况下,1μg的DNA模板进行反应,将得到20μg的标记RNA探针。 另一种更加直接的体外转录标记法,是先通过PCR方法制备DNA探针模板。扩增引物需要特殊设计,包含SP6,T3或T7 RNA聚合酶的启动
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