- ¥190
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY100931-100
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输和4℃或-20℃避光保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
ROX Reference Dye II
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
100 μL
ROX Reference Dye II 在580 nm 左右处有最大吸收，不参与PCR反 应，用于校正定量PCR反应时孔与孔 之间产生的荧光信号值误差。适用于 ABI PRISM® 7500/7500 Fast RealTime PCR System和Stratagene公司 的Mx3000P等定量PCR仪，而对于ABI PRISM®7000/7700/7900HT/7300 和 S t e p O n e P l u s T M R e a l - T i m e PCRSystem等定量PCR仪，请使用浓 度比ROX Reference Dye II 高的ROX Reference Dye进行校正。
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文献和实验扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书，检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是，需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料，用以校正仪器系统以外的物理误差，比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的，当用此类试剂的时候，应该将 ROX 参比
。G. 反应体系的设置：A-G这五个步骤简单设置好，可以保存，修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料，默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面；也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料，所以选择“none”。设置好之后，就可以把配置好的PCR管放进仪器，点击RUN！Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
时发现，这个实验其实是有扩增的，但原本应该平直的 ROX 荧光曲线却呈现出一个跟 SYBR 颠倒对称的图形（图 12B）。我们查看 Raw data 时发现其第一通道荧光（FAM）是正常上升的，第四通道荧光（ROX）也是维持在正常水平，这就怀疑可能与校准文件异常有关。这台仪器在重新做了 SYBR 荧光校准以后，扩增曲线就恢复正常了，也能得到正常的 CT 值。 图 12 校准文件异常导致曲线异常 关于扩增曲线异常的更多案例分析可以参考我们之前的推文《荧光定量 PCR 异常扩增曲线分析攻略
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