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怎样选择内参蛋白？

内参就是内部参照，一般是指管家基因编码表达的蛋白，它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照参。内参则可以校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差，保证实验结果的准确性。 此外，内参可以作为空白对照，还可以检测蛋白转膜情况是否完全、整个 WB 显色发光体系是否正常。内参抗体种类很多，比如 β-Actin、β-Tubulin、GAPDH 等，下面简单介绍下如何选择内参。 一、目的蛋白分子量 选择内参抗体时，应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的

亲和层析

填料 根据亲和层析的几种应用方向，亲和层析的填料主要分为标签蛋白纯化填料、抗体及抗体片段纯化填料、族特异性亲和填料以及预活化填料四种。   1. 标签蛋白纯化填料 为了简化纯化流程以及方便后期的检测，在进行重组蛋白表达时往往会加入标签。常用的标签包括His标签、GST标签、Strep标签及MBP标签等 （表8)。His标签由于分子量很小，几乎不会影响靶蛋白结构和功能而被广泛使用。GST和MBP标签常用于促进蛋白的可溶表达，尤其对于难表达的真核细胞蛋白和病毒蛋白有很好的促溶表达能力。Strep

哺乳动物转录调控研究现状与展望

相关专题   不同细胞具有不同的表型，这是由于在这些细胞中基因的差异表达所导致的。因此，一定存在一些转录调控机制，去控制管理不同细胞各自所必需的转录方式。基因调控 这一领域的研究正是迅速地揭示转录的机制。不过，我们也必须要同事意识到转录调控的无限的复杂性。 正常的细胞进行正常的转录。但由于转录是基因表达 最基础的一级，所以当该转录调控出现异常时则很可能会出现不同的疾病。也正因如此，哺乳动物转录调控研究应用广泛于多种与人相关