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文献和实验CCMB buffer to make chemical competent cell
TOP10 chemically competent cells ( modified from http://openwetware.org/wiki/TOP10_chemically_competent_cells#CCMB80_buffer) I also use this protocol to make Ecoli compent cell. It is pretty good. You can start from the fresh clone on plate
【专题讨论】蛋白质组学 (Protemics)&修饰蛋白质组学(PTM Protemics)科学技术交流&职业生涯发展交流
信息的指令, 它通过有丝分裂和减数分裂将遗传信息从上一代传递给下一代。表观遗传学的研究内容分为基因转录过程中的调控和基因转录后的调控两部分 。主要包括DNA甲基化, 组蛋白修饰, 非编码RNA等。 组蛋白修饰是表观遗传学研究的重要方向之一。组蛋白有很多修饰形式, 包括乙酰化、甲基化、琥珀酰化,巴豆酰化,磷酸化、泛素化、SUMO化、ADP核糖基化等等。由于组蛋白和DNA组成的核小体是染色质结构包装的基本单位,组蛋白修饰能够通过改变核小体构象最终影响整个染色体的结构和功能。组蛋白修饰在转录调节,DNA
最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。一点失败的教训以及纯化过程中的体会,贴出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正。 1. 首先介绍一下背景。载体是invitrogen公司的pET22b,Amp抗性。菌株是该公司的BL21 star DE3,是一个蛋白降解酶突变菌株,也就是说是一种优化表达菌株。 2. 第一次失败。第一次做诱导的时候,重复了很多次,但总是诱导不出来。PCR,酶切都正确。但没等测序结果出来就开始做了。失败了。曾在园子求助。后来证明是引物
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