植物线粒体提取试剂盒厂家现货

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北京百奥莱博专业生产销售植物线粒体提取试剂盒厂家现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：植物线粒体提取试剂盒厂家现货
编号：XH053
产地：国产|进口
规格：50T/100T
品牌：百奥莱博
二，说明
植物线粒体提取试剂盒可用于从植物叶片组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于田间采摘或者实验室培养的植物叶片中线粒体的制备。其制备物，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步DNA提取。
三，操作步骤
1. 样本采集前处理：无论田间自然生长还是实验室组织培养，采摘前须避光生长24-48小时，以减少叶片组织中糖类及叶绿体含量。取适量Lysis Buffer，加入0.5% β-巯基乙醇，10ml Lysis Buffer加入50ulβ-巯基乙醇，混匀，形成Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，此溶液可2-8度保存一个月。
2. 叶片用蒸馏水清洗2-3次，滤纸吸干，有条件请用液氮研磨叶片1-2克，研磨完后，取800mg左右研磨的叶片粉，加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，混匀。如果无条件（无液氮），请预冷研钵，取洗过的叶片1000 mg，用剪刀剪为碎块放入玻璃匀浆器或者研钵中。加入1.5ml预冷的Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，冰上研磨至看不见明显组织块；
3. 将研磨物放置合适的离心管，4℃，1000× g 离心5 min；
4. 将上清转移到一新的离心管中，在沉淀中加入0.5ml Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，混匀，再次4℃，1000× g 离心5 min，取上清；合并两次上清，将上清4℃ 1000× g 再次离心5 min。
5．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 16,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。
6. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000× g 离心5 min；
7．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 16,000 × g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
8. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。
四 注意事项：
1. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
2. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接在第7步的沉淀中加入上样缓冲液裂解线粒体。
3. β-巯基乙醇有毒，请注意通风及防护
五 储存：本试剂盒三个月内使用可4℃储存，长期可置-20℃。

一般低温度心机都有离心力显示，如果没有，可以用以下公式简单的换算。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；
[rpm] ２即：转速的平方； R为半径，单位为厘米。

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·植物线粒体DNA提取试剂盒
编号：XH002
规格：50T/100T
储存条件：2～8℃，有效期一年。DNASE I -20℃保存。使用前，在DNase I中加入600ul（50T）或者1200ul（100T）的DNA酶反应液，分装后-20℃保存三个月，如果超过三个月，活性可能会降低，请自行订购DNASE I。线粒体裂解液使用前常温保存，如有沉淀可37℃水浴溶解，不影响使用。
三，说明
线粒体DNA提取的关键是尽可能的去掉核DNA。本试剂盒利用差速离心得到比较纯净的线粒体，再利用DNA酶消化和裂解缓冲系统等多步骤去掉核DNA，最后得到纯净的线粒体DNA。可用于PCR等对纯度要求较高的实验。
本试剂盒用于从植物叶片中分离出完整而纯化的线粒体。适合于田间采摘或者实验室培养的植物叶片中线粒体DNA的提取制备。
四，操作步骤
准备工作：在DNASE I中加入600ul（50T）或者1100ul（100T）的DNA酶反应液，适当分装后-20℃保存。线粒体裂解液保存于常温，如有沉淀37℃水浴溶解，离心机温度下降到4℃（2-8℃），如无低温离心机，也可以常温离心，并将离心时间为10min的改为5min，但最后所得DNA品质及产量可能会有一定影响。
1. 样本采集前处理：无论田间自然生长还是实验室组织培养，采摘前须避光生长24-48小时，以减少叶片组织中糖类及叶绿体含量。取适量植物细胞裂解液，加入0.5% β-巯基乙醇，10ml 植物细胞裂解液加入50ulβ-巯基乙醇，混匀，形成植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液，此溶液可2-8度保存一个月。
2. 叶片用蒸馏水清洗2-3次，滤纸吸干，有条件请用液氮研磨叶片1-2克，研磨完后，取800mg左右研磨的叶片粉，加入1.5ml预冷的植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液，混匀。如果无条件（无液氮），请预冷研钵，取洗过的叶片1000 mg，用剪刀剪为碎块放入玻璃匀浆器或者研钵中。加入1.5ml预冷的植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液，冰上研磨至看不见明显组织块；
3. 将研磨物放置合适的离心管，4℃，1000× g 离心5 min；
4. 将上清转移到一新的离心管中，在沉淀中加入0.5ml Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液，混匀，再次4℃，1000× g 离心5 min，取上清；合并两次上清，将上清4℃ 1000× g 再次离心5 min。
5．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 16,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。
6. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000× g 离心5 min；
7．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 16,000 × g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
8. 加入100ul DNA酶反应液重悬线粒体，吹打均匀后，再加入10ul DNASE I溶液（见准备工作），混匀，37℃水浴10min。此步为消化线粒体表面吸付的核DNA。4℃， 12,000 × g 离心5 min。尽可能的弃上清，再加入200ul TE 重悬线粒体沉淀，4℃， 12,000 × g 离心5 min，洗去残留的DNA酶。
9.得到的沉淀，用200ul TE缓冲液重悬线粒体沉淀，加入10ul RNase A。加入200ul线粒体裂解液，轻轻混匀（不可吹打），放置1-2min，再加入150ul蛋白沉淀液，迅速混匀。4℃， 12,000 × g 离心5 min。此步骤可进一步去除核DNA。
10．取上清，加入一新的离心管中（如用于酶切分析，可加入此步：选用等体积的酚氯*(代"仿")异戊醇25:24:1抽提一次，再用氯*(代"仿")抽提一次，或者直接用氯*(代"仿")抽提两次，一般来说，此步可去掉一些微量蛋白及糖类，但会造成线粒体DNA的损失，因而用于PCR时可省，并不影响后续实验），加入0.6倍体积的异丙醇（如无异丙醇，可加入2.5倍体积的乙醇沉淀DNA，如离心管太满可分两管）及5-10ul 核酸核酸助沉剂，混匀，-20℃沉淀半小时左右（此步可省），4℃， 12,000 × g 离心10 min。
11. 弃上清，再加入1ml 70%乙醇清洗，4℃， 12,000 × g 离心5min。重复用70%乙醇洗一次。
12. 弃上清，再次离心1min 吸弃上清，不要碰到管底，开盖凉干约5-105min。
13．加入20-30ul TE缓冲液,轻弹管底，37℃水浴5分钟，线粒体DNA溶解。
14. 进行DNA电泳检测及-20℃保存，进行下步的实验。
四 注意事项：
1. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
2. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接在第7步的沉淀中加入上样缓冲液裂解线粒体。
3. β-巯基乙醇有毒，请注意通风及防护

一般低温度心机都有离心力显示，如果没有，可以用以下公式简单的换算。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；
[rpm] ２即：转速的平方； R为半径，单位为厘米。


植物线粒体提取试剂盒厂家现货关键词：XH053,百奥莱博,植物线粒体提取试剂盒

ARB12050 大鼠二胺氧化酶(DAO)含量检测 Rat diamine oxidase,dao ELISA KIT
ARB10119 人L选择素(L-SelectIn/CD62L)elisa检测 Human l-selectin ELISA KIT
ARB12047 大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)Elisa定量检测 Rat aldehyde dehydrogenase,aldh ELISA KIT
11139-85-8 Chelex 100 sodiumA熬和树脂
ARB13268 小鼠溶菌酶(LZM)尿液中含量检测 Mouse lysozyme,lzm ELISA KIT
PY01-141 马铃薯浸出粉 250克
3-[N-(1,1-二甲基-2-羟yi基)]氨基-2-羟丙烷磺酸钠盐 2-Aminopyrimidine 102029-60-7
ARB10658 人血管活性肽酶抑制剂(VPI)Elisa分析 Human vasopeptidase inhibitors,vpi ELISA KIT
ARB13069 小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)elisa检测操作说明书 Mouse pulmonary activation regulated chemokine,parc ELISA KIT
6-氯嘌呤 Rink Amide AM resin 87-42-3
Fmoc-L-羟脯氨酸 Roxithromycin 88050-17-3
ARB10391 人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)elisa检测说明书 Human soluble Human leucocyte antigen g1,shla-g ELISA KIT
ARB14271 猪免疫球蛋白M(IgM)酶免分析
ARB12681 大鼠瘦素(LEP)含量测试 Rat leptin,lep ELISA KIT
ARB13854 猪去甲肾上腺素(NE)血清中含量检测 Porcine noradrenaline,ne ELISA KIT
ARB12606 大鼠脱氢表雄酮(DHEA)Elisa分析 Rat dehydroepiandrosterone,dhea ELISA KIT
植物线粒体提取试剂盒厂家现货关键词：XH053,百奥莱博,植物线粒体提取试剂盒


·4×甲醛变性胶上样缓冲液
编号：XH051
规格：1ml
4×甲醛变性胶上样缓冲液
配方（10ml）：
4.0ml 10×MOPS 缓冲液
3.1ml 甲酰胺
2.0ml 100%的甘油
720ul 37%的甲醛
80ul 0.5M EDTA（PH 8.0）
5mg 溴酚蓝
100ul DEPC水
混匀，样品管级吸头经过处理后分装。-20℃保存。常用时可2-8℃存放。
使用方法：取6ul RNA样品加入2ul上样缓冲液混匀上样。
如果只是进行普通的RNA快速电泳，可选用6×RNA loading buffer。常规的琼脂糖，高电压（250V），快速电泳。

·载体两性电解质PH4-9
编号：XH072
规格：12ml
别名：两性电解质两性电解质载体(PH4-9)：Ampholyte solution、Ampholine。
性状；近无色至浅黄色透明液体，有粘性，为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多氨基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度：为40％的溶液
用途：用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存：充氮密封4℃保存。保持期，两年。开启后请尽快用完。

·Taq Plus DNA Polymerase
编号：XH023
规格：500U/2500U
产品简介：
本公司生产的Taq Plus DNA Ploymerase是Taq酶和Pfu酶的1：1混合物，既有5’→ 3’核酸外切酶活性，又有3’→5’核酸外切酶活性，具备扩增效率高、错配率低的特点。与Taq酶相比，Taq Plus DNA Ploymerase具有扩增长度增加（对简单模板有效扩增长度可达20kb，对复杂模板也可达10kb）、保真度好等优点；与Pfu酶相比，具有扩增速度快、反应效率高的优势。其PCR产物可直接进行TA克隆，如需提高克隆效率，建议先纯化，加A后再进行TA克隆。常用于一些对保真度要求高和模板结构复杂（如GC含量高、有二级结构等）的PCR扩增，大多数情况下可替代Taq酶。

活性定义：
1单位(U) Taq Plus DNA Polymerase活力定义为在74℃，30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

保存
-20℃
2-8℃

产品内容：
酶储存缓冲液
10×Taq Plus Buffer
20 mM Tris-HCl (pH 8.0)
200 mM Tris-HCl (pH 8.4)
0.1 mM EDTA
200 mM KCl
1 mM DTT
100 mM (NH4)2SO4
100 mM KCl
15 mM MgCl2
50% glycerol
1%Triton X-100
Stabilizers
其它

注意事项：
1、Taq Plus DNA Ploymerase应储存于-20℃，有效期12个月。
2、取Taq Plus DNA Ploymerase做PCR反应时，请用高压灭菌处理过的吸头。
3、一般情况下，Taq Plus DNA Ploymerase应该可以很好地扩增5kb以下的片段。能否成功扩增更长的片段，主要与模板的结构和引物的设计有关，如果扩增长片段有困难，最好选用Long Taq DNA Ploymerase。

北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销售商，恭候您的咨询选购植物线粒体提取试剂盒厂家现货。