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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
长期
- 英文名:
Coomassie brilliant blue R250
- 库存:
535
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
5g
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京现货考马斯亮蓝R250优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货考马斯亮蓝R250优惠价
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:YT950
英文名:Coomassie brilliant blue R250
本品是常用的蛋白染色剂。
分子式:C45H44N3O7S2Na
分子量:825.97
储存条件:室温。
更多有关北京现货考马斯亮蓝R250优惠价的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·PP2B抑制剂(环胞素A)(免疫抑制剂)
编号:YT323
英文名称:Cyclosporin A
规格:50mg
本品是一种常用的免疫抑制剂。Cyclosporin A通过和cyclophilin形成复合物,从而抑制蛋白磷酸酯酶2B的活性,最终抑制T细胞受体信号通路而实现免疫抑制作用。Cyclosporin A 还可以抑制白介素-1α、脂多糖或TNFα诱导的一氧化氮合成;可以阻断线粒体中的细胞色素C释放,但也可以诱导大鼠淋巴细胞和小鼠B细胞淋巴瘤细胞株WEHI-231的细胞凋亡。Cyclosporin A可溶于DMSO(25mg/ml)、乙醇、甲醇或氯*(代"仿"),微溶于水。
CAS:59865-13-3
分子式:C62H111N11O12
分子量:1202.61
纯度:>99%
储存条件:-20℃。
·PVP封片液
编号:YT094
英文名称:Polyvinylpyrrolidone Mounting Medium
规格:10ml
本品是一种采用polyvinylpyrrolidone(PVP)为主要封片介质的无毒水性封片液,可以用于常规的各种切片、涂片等的封片。本PVP封片液中的主要有效成分为PVP和甘油。本封片液封片后,不使用盖玻片也可以直接在显微镜下观察。PVP干燥后会在样品表面产生一层保护膜。本PVP封片液几乎是一种最易用的封片液,相对不易产生气泡,封片液的流动性比较好,封片比较方便。封片后盖上盖玻片,盖玻片会被很好地粘附在载玻片上。 按照每个样品封片需要50微升计算,足够用于200个样品的封片。
注意事项:
1. 使用完毕,请注意拧好瓶盖。PVP封片液中的水分不断挥发,会导致该封片液逐渐变得非常粘稠。本封片液本身有一定的粘稠性,但由于水分过度蒸发出现过于粘稠至不便使用或有微生物污染则宜丢弃。
2. 使用本封片液封片后,随着封片液中的水分逐渐减少,折光率会逐渐上升。折光率的变化通常不会影响样品染色部位的观察,但会影响到样品未染色部分的观察。
储存条件:室温,有效期一年。
北京现货考马斯亮蓝R250优惠价关键词:考马斯亮蓝R250,YT950,Coomassie brilliant blue R250
·Ad-mCherry-GFP-LC3B
编号:YT160
英文名称:adenovirus expressing mCherry-GFP-LC3B fusion protein
规格:1ml|10×1ml
本品是一种可以表达mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒,可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬的检测。
LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族,其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止,LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个氨基酸残基的蛋白,在蛋白合成后,被Atg4所酶切而失去了C端的22个氨基酸蛋白,从而暴露出C端的甘氨酸,人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中,其C端暴露的甘氨酸经过一个类似泛素化的过程,以ATG7为E1样激活酶, 以ATG3为E2样连接酶,以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶,在C端甘氨酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同,LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后,自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切,而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大,但由于其极强的疏水性,在SDS-PAGE电泳时,LC3B II比LC3B I迁移得更快,其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后,在非自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中;而在自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上,以斑点的形式表现出来。
自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关,在饥饿等不利的环境条件下, 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分,为细胞的生存提供能量及原材料,促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用,自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。
Ad-mCherry-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒,感染后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白mCherry、绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白,呈现明亮的红色和绿色荧光,可以用于细胞自噬的检测。
自噬小体在与溶酶体融合过程中,溶酶体内的酸性环境会导致GFP荧光淬灭,这为追踪GFP-LC3B的细胞定位增加了难度。mCherry是一种来自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的单体红色荧光蛋白,当其与GFP进行LC3B的共同标记时,在GFP被溶酶体酸性环境所淬灭的情况下,可以发出红色荧光的mCherry因为其卓越的稳定性而被保留。因此,通过融合表达mCherry-GFP-LC3B蛋白,可以非常有效地追踪自噬过程。在用Ad-mCherry-GFP-LC3B腺病毒感染细胞后,在非自噬的情况下,荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B以弥散的黄色荧光(mCherry和GFP的综合效果)形式存在于细胞质中;而在自噬的情况下,荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上,以黄色斑点的形式表现出来(LC3B dot or punctae);当自噬体与溶酶体融合后,因GFP荧光的部分淬灭而以红色斑点的形式表现出来。
腺病毒感染细胞后为瞬时表达,通常不会与基因组DNA重组,不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后,有效表达时间通常不少于7天,不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。
百奥莱博的Ad-mCherry-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统,感染普通的细胞后不能进行扩增和重组,从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。
本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。
本产品的滴度≥1×108 pfu/ml,使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞,每孔50万细胞计算,共可以感染10个孔;如果按照20 MOI感染24孔板的细胞,每孔10万细胞计算,共可以感染50个孔。如果MOI值提高,则相应可以感染的孔数会减少;如果MOI值降低,则相应可以感染的孔数会增加。
注意事项:
1. 反复冻融会降低病毒滴度,如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后,如果在一周内使用,可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年,可能会导致滴度下降,此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体,请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1),没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病,可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。
储存条件:-20℃,有效期1~2个月。
北京现货考马斯亮蓝R250优惠价关键词:考马斯亮蓝R250,YT950,Coomassie brilliant blue R250
·酸性磷酸酶检测试剂盒
编号:YT367
英文名称:Acid Phosphatase Assay Kit
规格:120次
本试剂盒是一种用于快速检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性的试剂盒。本试剂盒包括标准品和空白对照,本试剂盒共可进行120个样品的检测。
试剂盒组分:
检测缓冲液———————————15ml
显色底物————————————2管
p-nitrophenol溶液(10mM)—————0.1ml
反应终止液———————————20ml
酸性磷酸酶也称酸性磷酸酯酶,是一种在溶酶体中含量较高的酸性水解酶,被认为是鉴定溶酶体亚细胞组分的标志物。酸性磷酸酶是一个蛋白家族,哺乳动物中其分子量从18kD到100kD不等。酸性磷酸酶分为两类,一类为酒石酸盐敏感型,一类为氟离子敏感型。溶酶体中的酸性磷酸酶为酒石酸盐敏感型,而红细胞和巨噬细胞中的酸性磷酸酶为氟离子敏感型。
血浆中的酸性磷酸酶活性范围在2-7.9U/L,血清中酸性磷酸酶的活性范围在2.5-11.7U/L。精液(semen)中含有高浓度的酸性磷酸酯酶,活力可以达到87-436KU/L。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下,呈黄色产物,可以在400-415nm检测吸光度。产物黄色越深, 说明酸性磷酸酶检活性越高,反之则酶活性越低。据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。
注意事项:
1. 如果希望进行酶活性的绝对定量,进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐采用孵育30分钟等较长的时间,以减小操作过程中的时间误差。同时如果样品中酶活性较高,则可以预先适当稀释样品。
2. 样品溶液中须避免出现各种酸性磷酸酶抑制剂。
3. 一管显色底物配制后需当日使用完毕,因此请注意适当多准备一些样品一起检测,以避免试剂盒浪费。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货考马斯亮蓝R250优惠价。
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文献和实验V,95 V 进行比较,直至样品中染料迁移至离下端1cm 时停止电泳。 1.2.4 固定、染色和脱色 取出平板中的凝胶立即浸泡于固定液(50 % 乙醇,10 % 冰乙酸) 中固定1h, 再将固定后的凝胶置于45℃的染色液(1 g·L-1考马斯亮蓝R250的25%乙醇,8%冰乙酸) 中浸泡15~30 min , 然后用蒸馏水将凝胶淋洗一次,最后,多次变换脱色液(25%乙醇, 8%冰乙酸,以上均为体积分数) ,直至凝胶上背景脱净为止。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
贮存。 ⑦电极缓冲液(内含0.1%SDS,0.05mol/LTris~0.384mol/L甘氨酸缓冲液pH8.3):称Tris6.0,甘氨酸28.8g,加入SDS 1g,加蒸馏水使其溶解后定容至1000ml。 ⑧1%琼脂(糖)溶液:称琼脂(糖)1g,加电极缓冲液100ml,加热使其溶解,4℃贮存,备用。 (4)固定液 取50%甲醇454ml,冰乙酸46ml混匀。 (5)染色液 称考马斯亮蓝R250 0.125g,加上述固定液250ml,过滤后应用。 (6)脱色液 冰乙酸75ml
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)
)1g,加电极缓冲液100ml,加热使其溶解,4℃贮存,备用。 (4)固定液 取50%甲醇454ml,冰乙酸46ml混匀。 (5)染色液 称考马斯亮蓝R250 0.125g,加上述固定液250ml,过滤后应用。 (6)脱色液 冰乙酸75ml,甲醇50ml,加蒸馏水定容至1000ml。四、操作步骤: (一)安装夹心式垂直板电泳槽 关心式垂直板电泳槽操作简单,不易渗漏,其装置如图16-4。这种电泳槽两侧为有机玻璃制成的电极槽,两个电极槽中间夹有一个凝胶模,该模由1个 形硅胶框、长
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