FXR-Luc荧光素酶报告基因质粒批发

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售，产品线涵盖FXR-Luc荧光素酶报告基因质粒批发在内的细胞生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：FXR-Luc荧光素酶报告基因质粒批发
英文名：FXR Luciferase Reporter Plasmid
规格：1μg
品牌：百奥莱博
编号：SY0128
FXR-Luc荧光素酶报告基因质粒(FXR luciferase reporter plasmid)是用于检测FXR转录活性水平为目的的报告基因。

FXR(farnesoid X receptor)是一种多功能核受体，能参与机体多种生理活动的调节，包括胆汁酸代谢、脂代谢、糖代谢、肝脏保护等过程。

FXR-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Farnesoid X Receptor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMFXR-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个FXR结合位点，可以高灵敏度地检测FXR的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得FXR报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMFXR-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

更多有关FXR-Luc荧光素酶报告基因质粒批发的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·BL21 (DE3)化学感受态细胞
编号：SY0014
英文名称：BL21 (DE3) Chemically Competent Cell
规格：100μl×10管
本品是在大肠杆菌BL21（DE3）菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的高效表达宿主，其基因型为F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。经检测，本品无外源质粒DNA残留，转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。

组份：
BL21 (DE3)化学感受态细胞 100μl×10
pUC19（0.1 ng/μl） 5μl

注意事项

1）感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
2）待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3）待转化DNA加入感受态细胞后，请勿用移液枪吹打，轻轻弹匀即可。
4）为确保最高效率转化，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。
5）本品应于-80℃保存，请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰水浴中融化。
2）将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。
3）42℃水浴，不要晃动，准确热激90s后，立刻置于冰水浴中，静置2-3分钟。
4）向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，37℃水浴锅中静置10分钟。
5）150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。
6）2,500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。
【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。

储存：-80℃。


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·Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒
编号：SY0501
英文名称：Calcein-AM/PI Double Stain Kit
规格：500T
Calcein-AM是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，发绿色荧光（Ex=490nm, Em=515nm）。因其在传统的Calcein（钙黄绿素）基础上引入乙酰甲氧基甲酯（AM）基团，增加了疏水性，使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后，Calcein-AM（本身不发荧光）被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子Calcein，从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如BCECF-AM和CFDA)相比，由于Calcein, AM细胞毒性极低，是最适合用于活细胞染色的荧光探针，而且不会抑制任何的细胞功能，如增殖和淋巴球的趋化性。
由于死细胞缺乏酯酶，Calcein-AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。因此，Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶（PI）等联合使用，同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）不能穿过活细胞的细胞膜，仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光（Ex=535 nm, Em=617 nm），因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。而用545 nm激发，仅可观察到死细胞。

本试剂盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的双重染料，来进行活细胞和死细胞的双重染色标记，从而进行活细胞和死细胞水平的分析。根据我司优化的实验体系，单次就200µl细胞悬液进行染色。

注意事项
1）由于Calcein-AM对湿度非常敏感，若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后，必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量，分装密封保存。Calcein-AM工作液必须现配现用。
2）碘化丙啶（PI）有一定的致癌性，操作时一定要注意防护。若接触到皮肤，需要立即用自来水清洗。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，有效期12个月


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·台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒
编号：SY0508
英文名称：Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
规格：100T
本试剂盒各组分均以无菌形式提供，可直接用于细胞实验。台盼蓝（Trypan Blue），一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料，可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜，将其染成蓝色，而活细胞由于其细胞膜的完整性，可将台盼蓝排斥在外，因此，通过颜色的变化即可将活细胞（活细胞呈透明无色）和死细胞鉴别开来，基于此原理，本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外，台盼蓝（合适浓度）还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。

使用方法

1）对于悬浮细胞，离心收集细胞，对其充分清洗后，加入适量细胞重悬液重悬细胞制成单细胞悬液；对于贴壁细胞，先用胰酶消化细胞，再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。
2）取0.1ml单细胞悬液，按照1:1比例与0.1ml 0.4%台盼蓝染色液充分混匀，室温染色3~10min。
【注】：因台盼蓝具有细胞毒性，染色时间过久会导致部分死细胞染色，干扰计数。通常染色3min即可。
3）取少量上述染色细胞加入血细胞计数板，于显微镜低倍镜下计数，分别计算着色细胞（即损伤细胞和死细胞）和总细胞。
【注1】：用移液枪加染色细胞时，沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。
【注2】：1mm2方格内细胞数通常控制在20-50 cells，当细胞数超过200个，需重新调整稀释倍数。
4）按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比，
a，计算每ml细胞数目：Cells/ml=1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104；【注】：此时的稀释倍数为：步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数
b，总细胞数目：Total cells=（Cells/ml）×最初制备单细胞悬液的总体积
c，细胞活力值：Viability（%）=（总细胞数-总着色细胞数）/总细胞数×100
【注】：通常情况，健康的对数期培养细胞，活细胞至少占到95%。

注意事项
1）细胞计数前需对细胞进行充分的清洗，因为细胞对血清蛋白具有非常高的亲和力，残留血清蛋白会导致较暗的染色背景。
2）台盼蓝对人体有害，请注意小心防护。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：室温，有效期2年

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