- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL90211
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
Mini PCR Clean-Up Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50次/100次
低载量PCR片段纯化试剂盒
编号：KL90211规格：50次/100次
英文名：Mini PCR Clean-Up Kit
产品简介:
本试剂盒可用于PCR产物回收,并且对于一些酶反应液回收(酶切、连接、探针标记等)也同样适用。试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅胶膜。可回收50 bp－40 Kb的DNA片段,回收效率可达90%。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
1.高效,回收效率高达90%。
2.最大载量为5μg,相当于最多只能能处理50 μL的PCR体系。
3.快速,整个过程只需要十余分钟,可同时处理多个样品,节省时间。
4.纯度高,本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR等多种分子生物学实验。
5.用途广,本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。
6.处理量大,每个离心吸附住最多可吸附的DNA量为5μg。
7.价格便宜,比国内绝大多数同种产品的价格便宜。
8.储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
使用及效果:
在含DNA片段的PCR反应产物中,加入3倍体积的专用上柱液,60℃水溶5分钟,转移溶液到离心吸附柱中,离心半分钟,加入700 μ L通用洗柱液,离心半分钟。重复前一步操作一次。离心半分钟甩干剩余液体。将离心柱置于新的离心管中,加30-50 μL DNA洗脱液,离心半分钟,即得样品于离心管中。
运输及保存:
常温,有效期一年。
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文献和实验说明都显示单片段插克隆效率> 95%——片段越多效率会下降的）。市售产品中，是否包含感受态细胞，是否包含质粒纯化试剂或者 PCR 纯化试剂，都会影响产品单价。 后继的筛选验证工作同经典方法一样——抗性筛选，挑克隆扩增纯化，电泳+酶切或者 PCR 验证，最后挑几个最有可能的克隆去测序验证。如今分子克隆中的 PCR 一般都会选择高保真酶——出错率比 Taq 低得多、扩增长片段效果更好，要是几十 kb 还得是 EX 加长版高保真酶——相比后继测序验证的费用，这钱万万省不得的。 总而言之，基于同源序列的无缝
糖凝胶上检测分析。如图一所示 图一：2.2 超声破碎后，8000g，30秒，4°C,离心。将上清移入新的管子中。开始准备进行染色质免疫共沉淀（IP）。2.3 每份超声样品取50ul，这时的样品标记为INPUT，用于定量DNA浓度和作为PCR的空白对照。超声后的染色质应立刻冻入液氮中或者储存于-70°C可储存2个月。避免多次反复冻融。3检测DNA浓度1INPUT样品用于为后来的IP样品计算DNA浓度。DNA可采用PCR纯化试剂盒（加入70ul洗脱液，接着进入3.2a）或者采用酚/氯仿抽提（加入350ul
过的 DNA 聚合酶增强了与模板的亲和度，其灵敏度更高，因而所需的模板量少。过低的模板量会减少 PCR 的产量，过高的模板量可能造成非特异性扩增，所以 DNA 模板量的优化尤为重要。 除了 gDNA、cDNA 和质粒 DNA，PCR 产物也可作为模板以获得更高的产量。但 PCR 产物中存在的残余反应组分（如引物、dNTP、盐和副产物）可能会影响下一次的 PCR 反应。所以推荐在下一次 PCR 前使用 PCR 产物纯化试剂盒将 PCR 产物先进行纯化。 【DNA 聚合酶】 DNA 聚合酶是PCR扩增中最关键
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