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长期
- 英文名:
PAGE miRNABACK
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大量
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康朗生物
- 规格:
40次
miRNA PAGE胶回收试剂盒
规格:40次编号:KL70604
英文名:PAGE miRNABACK
产品简介:
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离200 nt以下的小片段RNA,尤其是20 nt左右的microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是目前市场上用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收miRNA片段的产品还很少,为此我公司开发了本产品。它具有下列特点:
1.可以回收15-200 nt的各种长度的RNA,包括100nt以下的miRNA片段。
2.溶液A中含有RNA助沉剂RNADOWN,miRNA回收率最高达到90%左右。
3.一站式,即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。
4.扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
5.试剂盒含固相RNase清除剂,可清除工作环境中RNase的污染。
使用及效果:
将切下的含小RNA片段的PAGE胶条放入1.5 mL RNase-free 塑料离心管中,-20℃或更低温度冷冻10-30分钟后用微型离心管专用研磨杵捣碎,加入相当于胶重量2-3倍的溶液A,在摇床上4℃摇晃3-5小时,13000-15000 g 4℃离心10分钟,取上清,再用0.2 mL溶液A洗涤捣碎的PAGE胶,离心后合并上清,加入2倍体积的溶液B,13000-15000 g 4℃离心10分钟,用1 mL溶液C洗涤一次后离心所得沉淀
即为回收的RNA片段,溶解在适量RNase-free水中待用。
运输及保存:
常温运输,4℃保存,保存期为一年。
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文献和实验江janice 求助:用的是天根 的胶回收试剂盒,11管PCR产物,差不多500微升的总体积,上四个孔电泳,电泳后用天根的盒子回收到四个EP管,每管40微升,取5微升电泳,居然没有成功,又取10微升电泳还是没有任何条带,不知道可否有人用天根的盒子,是否遇到这方面的问题,一般100微升的PCR产物,回收到多少体积比较恰当,纠结啊,回收了好几次电泳都没有目的条带,盒子是刚买的新盒子,谢谢好心人帮助 大鹏鸟 天根的盒子还是很好
频率。我们的 SSR 有很多优点呀,比如在真核生物基因组中分布较为广泛(植物中平均每 20~30 Kb 就会出现一个SSR)、可以轻松鉴别纯合子杂合子(微卫星共显性遗传)、所需 DNA 量较少(单位以 ng/ul 计)、成本较低等。我们实验室即是采用图位克隆的方法,对模式生物——水稻进行基因定位与克隆的。我们分离 PCR 产物用的是 8% 的丙烯酰胺凝胶电泳,一直效果不错,新生刚来的时候,就是从学习提水稻 DNA、扩 PCR、跑 SSR PAGE 胶(俗称「跑槽」,233333)开始进行基因的图位克隆的。理想
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形,但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量,因此,应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态,使其真空压力波动极少。 (1)试剂与配制:固定液:冰醋酸:甲醇:水(10:20:70) (2)电泳后的凝胶用5~10倍体积固定液在室温下固定,酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄。蓝色全部消失后,继续固定5min。为防止凝胶破裂,在进行步骤(2)之前可将凝胶浸泡于含20%甲醇、30%甘油的溶液
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