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- KALANG
- 中国大陆
- KL119
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
冷藏
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
1套
RealSafe核酸凝胶染色剂
编号：KL119规格：1套
● 简介：
RealSafe?是一种可以替代溴化乙锭（EB）的荧光核酸染色剂。与核酸结合后，RealSafe的荧光激发波长在280和502nm，最大发射波长在530nm。与SYBR或EB相比，RealSafe?具有以下特点：1 诱导突变的能力极低，使用更安全。
2 稳定性高：可以用微波炉直接加热，使用方便。
3 对核酸量不敏感，不会出现条带弯曲现象。
4 使用范围广：预染法和后染法都能使用；紫外和蓝光仪下都能观察；DNA和RNA都能染色。
● RealSafe的使用方法：注意：染料使用前应在常温下彻底融化混匀后使用。
1 RealSafe预染方法
1.1 将RealSafe 10000×in DMSO按1:10000加入到1×TAE或0.5×TBE中（例如：将5ul RealSafe 试剂加入到50ml 电泳缓冲液中），加入琼脂糖，充分混匀，用微波炉加热融化凝胶。如使用RealSafe in TAE buffer或RealSafe in TBE buffer，直接取适量体积的缓冲液加入琼脂糖，充分混匀，用微波炉加热融化凝胶。
1.2 浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。
1.3 紫外或蓝光下观察结果。
2 RealSafe后染方法
2.1 用1×TAE或0.5×TBE将RealSafe 10000×in DMSO稀释制成1X染色溶液。(例如：将10 μl RealSafe加入到100ml 1×TAE或0.5×TBE中)。如使用RealSafe in TAE buffer或RealSafe in TBE buffer，直接取适量体积的缓冲液直接使用。
2.2 将凝胶小心地放入合适的聚丙烯容器中，加入适量的染色溶液浸没凝胶。
注：由于RealSafe对光敏感，建议用铝箔纸把容器包裹好。不要使用玻璃器皿，容易吸附染料。
2.3 轻轻地摇动凝胶板，最佳的染胶时间为30 分钟，这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚丙烯酰胺的浓度和 DNA 的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高，染色所需要的时间就越长。染色后可以直接观察，不需要脱色。
2.4 紫外或蓝光下观察结果。
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文献和实验均匀沉入加样孔内.②在电泳中形成肉眼可见的指 示带，可预测核酸电泳的速度和位置.③使样品呈色，使加样操作更方便. 染色剂 核酸电泳后，需经染色后才能显现出带型，最常用的是溴化乙锭染色法，其 次是银染色. 溴化乙锭(ethidium bromide，EB)是一种荧光染料，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对 之间，在紫外线激发下，发出红色荧光.根据情况可在凝胶电泳液中加入终浓度为 0.5ug/ml的EB，有时亦可在电泳后，将凝胶浸入该浓度的溶液中染色10～15min.琼脂 糖
实验原理：琼脂糖是海藻中提取的线状高聚物，不同浓度的琼脂糖密度不同，一般PCR产物使用2%浓度，0.5Kb-10Kb的DNA使用1%浓度，基因组DNA使用0.3%-0.7%浓度；不同大小的核酸在同一浓度的凝胶中迁移率不同，因为分子越大其受琼脂糖的阻力越大，迁移率与碱基对的对数值成反比；同分子量不同构象的核酸迁移率也不同，超螺旋环状DNA迁移率〉线状DNA迁移率〉带切口环状DNA迁移率。荧光染料溴化乙锭可嵌入DNA堆积碱基间，DNA吸收的254nm的紫外辐射与溴化乙锭在302nm和366nm处
凝胶电泳是我们最基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动，因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中最常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinderTM、GoldViewTM、SybrGreenI、GelRed和GelGreen。下面对这几种核酸染料一一进行分析。1.EB溴化乙锭（EB）由于其价格便宜、使用方便已成为最常用的核酸染料，被广泛
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