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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
One-Step 96 Microwell Plate Plasmid DNAOUT
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
1次
一步法96孔板质粒DNA提取试剂盒(离心法)
规格:1次编号:KL80917
英文名:One-Step 96 Microwell Plate Plasmid DNAOUT
产品简介:
本产品是基于我公司革命性的一步法质粒DNA提取技术开发的高通量产品,只需要一种溶液瞬间即可以完成细菌裂解,并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。
它比经典的碱变性质粒制备方法更加快捷和方便。本产品的主要特点是:
1.超快,整个质粒DNA提取过程只需要不到10分钟,比传统的碱变性方法快捷。
2.回收率高,可以用单个菌落提取质粒,产量一般在3-5μg/mL饱和菌液。
3.DNA无损伤,使用我公司一步式裂解细菌技术,避免了强碱对DNA的损害。
4.DNA纯度高,几乎没有基因组DNA和RNA污染,OD260/280一般在1.7-1.9之间。
5.DNA可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆等实验。
6.重复性和稳定性好。
使用及效果:
先在96孔板的收集板中加入0.1-1 mL菌液,直到96个样品全部加入,离心2分钟,吸弃上清,再用排枪在收集板的微孔中加0.5 mL的溶液A,充分吹打混匀后转移到96孔板的吸附板中,套上收集板,离心2分钟,用0.5 mL通用预洗液洗1-2次,用0.5 mL通用洗柱液洗两次,干甩一次,最后用100 μ LDNA洗脱液洗脱即得质粒DNA。
运输及保存:
常温(溶液A需要4℃保存),有效期一年。
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文献和实验一步法提取质粒DNA主要用于鉴定阳性克隆。 主要步骤如下: 收集1.5mL菌体,彻底除去培养基; 加入50ulSTE缓冲液重悬菌体; 加入50ul酚:氯仿;异戊醇(25:24:1),混匀; 12000rpm离心5分钟,取上清到另一离心管中; 加入NH4Ac至终浓度2M,并加入2倍体积的乙醇,混匀,室温或冰上放置几分钟; 12000rpm离心5分钟,弃上清,75%乙醇清沉淀; 沉淀干后,以水或TE缓冲液溶解,便
体可通过传递信息影响目标细胞的功能,激活细胞信号通路,在免疫、凝血、肿瘤等生理病理过程中发挥作用。外泌体可以作为临床诊断中的生物标志物或疾病治疗的靶点,同时也可以作为药物载体,参与神经疾病和癌症等多种疾病的病理过程。 三、关键步骤 — 外泌体分离 外泌体的分离纯度对外泌体的功能研究非常重要,但是外泌体的分离一直是困扰外泌体研究人员的一个难题。虽然分离外泌体方法有很多种,包括差速超速离心法(超离法)、超滤法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、试剂盒法等。 但目前
良好的的基因治疗效果,在美国已经开展了临床研究,效果非常理想,因此具有广阔的应用前景。 慢病毒转染优点:1.外源基因表达水平较高、表达稳定;2.转染效率高,可感染分裂和不分裂的细胞,几乎可以感染所有类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞;3.慢病毒基因容易操作,易于制备大量病毒且滴度高;4.病毒基因组可整合到细胞基因组,易于构建稳定细胞株。 慢病毒包装技术:慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。将外源基因克隆进入表达载体,同时与包装质粒(表达病毒包装所需辅助蛋白)一起转染
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