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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Acid-Washed Glassbeads
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
10g
酸洗玻璃珠系列
英文名:Acid-Washed Glassbeads规格:10g
编号:KL100307
产品简介:
本产品是用浓酸充分洗涤后的玻璃珠,它是玻璃珠法破碎细菌和真菌的必备成分,主要用于从具有坚硬外壁的微生物细胞(如真菌孢子、酵母细胞、结核细胞等)中提取DNA、RNA和蛋白质大分子,因为用其他方法,包括酶解方法都很难沉底破碎具有坚硬外壁的微生物细胞。本产品具有下列特点:
1.经过充分的酸洗,免去用户接触具有腐蚀性的浓酸。
2.用本产品破碎具有坚硬外壁的微生物细胞,属于物理方法,不但比温和的化学破壁法普适性更好、重复性更好,同时不需要使用酶,因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白质污染。
3.用玻璃珠破碎法提取一个样品只需要10余分钟时间,非常快捷。注意:本产品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、离心吸附柱等配合使用才能用于核酸纯化。
4.一次可以处理5 mL的微生物样品。
使用方法及效果:
离心收集1-5 mL过了夜培养的真菌细胞,加入0.5 mL 溶液A和体积相当于0.5 mL的、直径为400 μm玻璃珠(大约0.5克),振荡器上以最高速度振荡10分钟,2000rpm离心2分钟,在上清中加入3倍体积的溶液B,上柱,用通用洗涤液洗两次,干甩一次,最后用50-100 μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA待用。
运输及保存:
常温,保存期为两年。
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文献和实验核酸酶的TE 缓冲液中重悬浮沉淀 16. 37℃培养10min 17. 重复9-12步 18. 在 50μl TE中重悬浮沉淀 裂解缓冲液: 2%(v/v)Triton X-100, 1%(v/v)SDS, 100mM NaCl, 10mM Tris 碱(pH8.0), 1mM EDTA(pH8.0) TE缓冲液: 10mM Tris碱(pH8.0), 1mM EDTA(pH8.0) YPD: 1%酵母浸膏, 2%细菌用蛋白胨,2%葡萄糖, 20min/升 高压灭菌 酸洗玻璃珠
一般初次用气相色谱仪的朋友对色谱柱不知怎样合理配置色谱柱,总希望柱子越多越好,盲目购置许多柱子或固定液、担体等,结果有许多闲置造成浪费。当然经济条件好的多配置一些。我从本人用多年的经验来谈起,一般准备几个柱子,固定液如SE-30(或者OV-101)、OV-17、PEG-20M、DEGS、FFAP,担体如白色担体、红色担体(包括未酸洗、酸洗、硅烷化)、GDX系列(或者Porapak系列),基本可以解决工作中绝大部分项目。
-100kDa蛋白。样品准备:需要准备Breaking 缓冲液(P60)及酸洗0.5mm玻璃珠。 细胞洗涤准备:(胞内或分泌表达) 1) 快速融化细胞沉淀,置于冰上。 2) 每1ml样品,加入100ul裂解缓冲液(细胞 上清)。 3) 加入等量的酸洗玻璃珠(0.5mm),通过置换来估算相等体积。 4) 涡旋30s,冰上孵育30s,重复8次。 5) 4度最大转速离心10min,将上清转移至干净的微量离心
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