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12个月
Tissue Cells RNA/DNA/Protein Isolation and Extraction Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒(国产,进口)在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒(国产,进口)
编号:ALH025
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:50次
英文名:Tissue Cells RNA/DNA/Protein Isolation and Extraction Kit
本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA和Protein。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物DNA/RNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上, 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无苯酚、氯*(代"仿")DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。
试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。
3.试剂盒的独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。
试剂盒组份(50次):
裂解液RLT——————————————50ml
去蛋白液RW1—————————————40ml
漂洗液RW——————————————10ml
RNase-free H2O———————————10ml
70%乙醇———————————————9ml RNase-free H2O(第一次使用前按说明加指定量乙醇)
抑制物去除液IR———————————25ml
漂洗液WB——————————————15ml
缓冲液APP——————————————60ml
洗脱缓冲液EB————————————10ml
基因组DNA吸附柱和收集管———————50套
RNA吸附柱和收集管——————————50套
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺脾脏DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3-4x106,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT 、抑制物去除液IR、去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 该试剂盒如需要用于植物样品有其实多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/RNA/Protein提取,请咨询技术人员,可能需要用到其它试剂。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留( DNase 消化也无法做到100% 无残留), 本公司的组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提高效果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒|核酸蛋白分离提取试剂盒
想要了解更多关于北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒(国产,进口)的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
·两步法耐热RT-qPCR试剂盒
编号:ALH193
英文名称:Two steps heat-resistant RT-qPCR Kit
规格:50μl×25次|50μl×50次
本系统由两个试剂盒组合而成。一个是反转录第一链耐热合成试剂盒(ALH268),一个是2×SYBR Green qPCR Mix(ALH185)。首先由反转录第一链试剂盒合成cDNA,然后以cDNA做模板用2×SYBR Green qPCR Mix进行荧光定量PCR扩增。
储存条件:-20℃。
·改良BCA法蛋白定量试剂盒
编号:ALH371
英文名称:Protein Quantitation Kit By BCA
规格:200次|500次|2500次|5000次
本试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成。众所周知,二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。
试剂盒组份(500次):
蛋白标准(5mg/mlBSA)—————0.5ml
溶液A—————————————50ml×2
溶液B—————————————2ml
产品特点:
1.步骤简单,45分钟内完成测定,比经典Lowry法快4倍而且更加方便。
2.灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml,最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl 。
3.BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20,60,80。
4.在20-2000μg/ml浓度范围内有良好的线性关系。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
注意事项
1. 蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用精确度高的加样枪。
2. 溶液A和溶液B混合成工作液时可能会有浑浊,但充分振荡混匀后就会消失,成为淡绿色的透明溶液。
3. 需酶标仪一台,测定波长为540-590nm 之间,562nm 最佳;需96 孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但是测定蛋白浓度时,需根据测定吸光度的杯子的体积,按比例调整A 液,B 液和样品的体积。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
4. BCA 蛋白定量试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保无EGTA,EDTA 低于10mM,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于1mM。不适用BCA
法时建议使用Bradford 法蛋白定量试剂盒。还可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,ACETONE/TCA 沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。
5. 为了加快BCA 法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热,但是切勿过热。
6. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,请试用Bradford 法蛋白定量试剂盒。
储存条件:-20℃,有效期1年。
北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒(国产,进口)关键词:核酸蛋白分离提取试剂盒,细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒
·酵母基因组DNA快速提取试剂盒(柱式吸附)
编号:ALH152
英文名称:Yeast genomic DNA rapid extraction kit
规格:50次
本试剂盒采用DNA吸附柱和独特的溶液系统,适合于从多种来源的酵母培养物中快速简单地提取基因组DNA。约3ml处于指数生长期的酵母培养液一般一次抽提可纯化出10-15μg的高质量的基因组DNA。纯化DNA产物可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。酵母细胞经lyticase处理去除细胞壁后,独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份:
缓冲液YB————————————20ml
结合液CB————————————11ml
漂洗液WB————————————15ml
抑制物去除液IR—————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
Lyticase(10U/μl)———————2500U
蛋白酶K冻干粉(20mg/ml)—————20mg
吸附柱AC————————————50个
收集管(2ml)——————————50个
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品裂解后操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇、异丙醇、β-巯基乙醇。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热到37℃和70℃备用。
4. 结合液CB 和抑制物去除液IR 中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇, 0.1M Na2EDTA,14 mMβ-巯基乙醇)。
配制方法:在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇,加入200 ml 0.5M Na2EDTA (pH 8.0) ,不需要调节PH 值,定容到1L,4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6. 菌体浓度检测一般OD600 值为1 的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml,由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD 值变化也很大,以上仅供参考。
7. 洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水
洗脱,但应该确保批pH 大于7.5, pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在-20℃。DNA 如果需要长期保存,可以用TE 缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA 可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京现货细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒(国产,进口)关键词:核酸蛋白分离提取试剂盒,细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒
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