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高纯酵母质粒大量提取试剂盒 D
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室温
12个月
Yeast high purity plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
600
北京百奥莱博科技有限公司
10次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售高纯酵母质粒大量提取试剂盒 DNA纯化,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:高纯酵母质粒大量提取试剂盒品牌:百奥莱博产地:国产|进口规格:10次编号:ALH093英文名:Yeast high purity plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)本试剂盒适用于大规模高纯度酵母质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合破壁酶特异消化酵母细胞壁,能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除, 最后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒组份(10次):RNaseA(10mg/ml)—————————0.75ml破壁酶—————————-————1g溶液YP1—————————————75ml溶液YP2—————————————75ml溶液YP3—————————————110ml去蛋白液PD-———————————100ml漂洗液WB-————————————25ml×2洗脱缓冲液EB-——————————20ml吸附柱和收集管(50ml)-——————10套试剂盒特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。注意事项1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达到至少6000g,带50ml转头的台式离心机。2. 溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。3. 通常酵母质粒拷贝数都很低,高拷贝质粒最大得率一般为每5 ml 培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为:1-5μl用做PCR 模板;5-10μl 用于转化大肠杆菌,选择高效率的感受态细胞。4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成, 与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇, 0.1M Na2EDTA,14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法:在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇,加入200 ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ,不需要调节PH 值,定容到1L,4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。6. 菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml,由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大,以上仅供参考。7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。储存条件:室温,有效期12个月。本品别名:高纯酵母质粒大量提取试剂盒|酵母质量大量制备试剂盒关键词:高纯酵母质粒大量提取试剂盒,酵母质量大量制备试剂盒欲咨询购买高纯酵母质粒大量提取试剂盒 DNA纯化,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
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