北京现货细菌基因组DNA大量提取试剂盒优惠

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名称：北京现货细菌基因组DNA大量提取试剂盒优惠
英文名：Bacterial massive genomic DNA Extraction Kit
规格：20次|50次
产地：国产|进口
编号：ALH139
本试剂盒用于快速的从各种细菌中大量提取基因组DNA。细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后)，首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份（20次）：
细胞核裂解液———————90ml×2
蛋白沉淀液————————60ml
DNA溶解液————————10ml
RNaseA(10mg/ml)—————500μl

产品特点：
1.不需要使用有毒的苯酚等试剂。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.结果稳定，产量高，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50 kb -150kb，可直接用于构建文库，PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到3,000xg，可容纳50ml 离心管的台式离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70％乙醇、0.5M EDTA 和Lysozyme（溶菌酶）(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞量，请联系我们索取其它处理量的操作手册。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：大量细菌基因组DNA提取试剂盒|细菌基因组DNA大量提取试剂盒

关于北京现货细菌基因组DNA大量提取试剂盒优惠的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·鱼类组织DNA提取试剂盒
编号：ALH181
英文名称：Fish tissue DNA Extraction Kit
规格：50次|100次
本试剂盒采用独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。本试剂盒适用于快速提取各种鱼类、虾类、扇贝等组织基因组DNA。

试剂盒组份(100次)：
裂解液SL————————————20ml
结合液CB————————————20ml
抑制物去除液IR—————————50ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
蛋白酶K————————————2×20mg
吸附柱AC————————————100个
收集管(2ml)——————————100个

注意事项：
洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH 大于7.5， pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在－20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用TE 缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mMEDTA，pH 8.0），但是EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
提示：第一次使用前请先在漂洗液WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
1. 切取不多于30mg 的组织材料，放入装有180μl 组织裂解液SL 的1.5ml 离心管中，涡旋振荡15 秒。
根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果裂解困难，可先用液氮研磨。
2. 加入20μl 的蛋白酶K 溶液(20mg/ml)，立刻涡旋振荡充分混匀。将裂解物放置在55℃水浴1-3 小时或者直到组织消化完全。
不同组织裂解时间不同，通常需0.5–2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
可选做步骤: 如果RNA 残留较多，需要去除RNA，可在完成步骤2 后加20μlRNase A(25mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10 分钟。
3. 加入200μl 结合液CB，立刻涡旋振荡充分混匀，70℃放置10分钟。
4. 冷却后加100μl 异丙醇，充分颠倒或涡旋振荡充分混匀，此时可能出现絮状沉淀。
5. 将上一步混合物和可能的沉淀都加入一个吸附柱AC 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 离心60 秒，倒掉收集管中的废液。
如果有不溶组织物可能堵住枪头，可将枪头在吸水纸上轻蹭去除不溶物；如果吸上来的混合物少则可以将枪头和不溶物一起弃去，该做法是为了去除不溶物，以免堵塞离心柱。
上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。
6. 加入500μl 抑制物去除液IR，12000rpm 离心30 秒，弃废液。
7. 加入700μl 漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心30秒，弃掉废液。
8. 加入500μl 漂洗液WB，12000rpm 离心30 秒，弃掉废液。
9. 将吸附柱AC 放回空收集管中，13,000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10. 取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100μl 洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热效果更好），室温放置3-5 分钟，12000rpm 离心1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2 分钟，12000rpm 离心1 分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积不应少于50μl，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。
11. DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。


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