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文献和实验过滤时,使用前必须根据被滤介质的理化性质选用合适的微孔滤膜。作为微孔滤膜的材料有很多种,其性能又有所不同。常用微孔过滤膜有如下几种: (1)水系微孔滤膜:一般用于纯水相的过滤。在过滤含有机相的混合溶剂时应尽量避免使用水系滤膜,以防滤膜被溶解,因为水系滤膜一般由纤维素类的材料制成。纤维素类膜材料的特点是亲水性好、成孔性好、来源广泛,但耐酸碱和有机溶剂能力差,抗蠕变性能差。水系滤膜系列包括:醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜、混酯膜再生纤维素膜、聚醚砜等。 (2)有机
)。将此溶液及 CTAB/NaCl 溶液加热至 65 ℃。对于每克新鲜的叶组织大约需要 4 mL 的 2-巯基乙醇/CTAB 抽提液和 0.4~0.5 mL 的 CTAB/NaCl 溶液;2. 用液氮 (-196 ℃) 或干冰 (-78 ℃) 冷冻匀浆器,将植物组织粉碎成为细粉,然后将冷冻的组织转移到一个含有机溶剂的试管或烧瓶中;3. 往粉碎的组织中加入预热的 2-ME/CTAB,混合使之充分湿润,于 65 ℃ 温育 10~60 min,期间不时混匀;4. 用等体积的 24:1 氯仿/异戊醇抽提匀浆
基,较为常用的量为5%~10%的比例,而特殊的低血清培养基血清量可降至3%左右,细胞的形态和功能不受影响。注:SLM120为清大天一公司低血清培养基,上图为培养24小时细胞密度,下图为48小时细胞密度。血清可在培养基灭菌后加入,也可与培养基混合后一起过滤。血清的添加一方面补充了细胞生长、增殖所需的一些因子(如生长因子等),另一方面也增加了培养基的黏滞度,这样可以降低细胞在悬浮培养中或被胰蛋白酶消化后的损伤。但是血清的加入也带来了很多问题,血清都是批量生产,各批之间差异很大,血清含一些对细胞产生毒性
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