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- 2025年11月12日
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文献和实验再创生命奇迹！日本科学家用干细胞培育出原始生殖细胞，并产生健康可育的大鼠后代
），这些 PGCLCs 被移植到无生殖细胞大鼠的输精管时，产生了有功能的精子细胞，进而产生健康的后代。 图片来源：Science 在哺乳动物中，原始生殖细胞（PGCs），是精子和卵子的前体，产生于前肠胚。前期的研究使用转基因小鼠等工具已经揭示了对 PGCs 命运决定至关重要的关键信号通路和转录调节因子。然而，早期胚胎发育中数量较少的 PGCs 限制了领域内对其进入特化生殖细胞的特定时间窗口的认识。 主要研究内容 在胚胎着床后，大鼠的胚泡会形成一个卵柱结构，包含一个多能的外胚层，而生殖细胞即由此产生
，先将 CFSE 染色和不染色的细胞 2 倍稀释，每孔 100 μl 细胞铺板。将 ConA 储存液进行 100 倍稀释，在 ConA 组中每孔加入 100 μl 配置好的 ConA 工作液，使得终浓度为 5 μg/ml（这时就是 200 倍稀释啦），在 PBS 组中加入 100 μl 完全培养基（这样铺板密度就为 5×105/ 孔）。将细胞培养板置于 37 ℃，5% CO2 的培养箱中培养 72 小时。4. 流式上机检测收集各组细胞，染色组细胞进行 CD3 表面染色，以对脾细胞中的淋巴细胞的增殖
2-8 μg 为佳）加入240 μL HBS中，混匀。另一管中则用HBS 将100 μM 的PEI 储存液稀释成10 μM，充分混合。然后取180 μL 10 μM PEI 溶液加入含有DNA 的HBS 中，充分混匀后室温静置20-30 min。最后将这420 μL 的PEI-DNA 混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％ CO2 的37℃ 温箱孵育。 注：每次用100 μM 的PEI 储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。 3. 培养6-10 h
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